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水质环境监测微生物质控方法 　　 摘要：水是生命之源，是生活中不可或缺的东西，饮用水水质的好坏直接关系到人的身体健康，我省农村居民大多数直接饮用水源水，集中式供水率低，且对饮用水质量没有必要的检测手段，水质无法得到基本的保证。随着农村经济的不断发展和生活水平的提高，居民对身体健康的关注越来越多，对生活饮用水水质的卫生质量意识也在不断增强。为了改善本省农村居民直接饮用源水的现状，国家已基本完成了我省农村饮水工程的安全建设，为了了解本省农村饮水工程水质微生物的污染状况，对我省农村饮水工程水质进行微生物指标中细菌总数，总大肠菌群和耐热大肠菌群污染调查，为相关部门提供依据。 关键词：水质环境监测;微生物;质控方法 中图分类号：X832 文献标识码：A 1、材料与方法 1.1内容 调查2010年山东省农村饮水工程水质微生物指标中细菌总数，总大肠菌群和耐热大肠菌群的污染状况。 1.2水样来源、试剂与仪器 在山东省范围内，对已进行供水的饮水工程进行采样，2009年至2010年共采水样259个。营养琼脂、乳糖蛋白胨培养液、伊红美蓝培养基、EC培养基、革兰氏染色液由广东环凯微生物科技有限公司提供。LRH-250生化培养箱、GHP―9050隔水式恒温培养箱、HHB11（420）电热恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅等，在检定周期内使用。 1.3检验方法 1.3.1菌落总数：按GB/T5750.12-2006中1.1.5.1条，以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样注灭菌平皿中，做一平行接种，同时另用一个平皿作为空白对照，分别倾注15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，于36 ℃±1 ℃培养48h，进行菌落计数，按GB/T5750.12-2006表1规定的限值，超出标准为阳性结果。 1.3.2总大肠菌群：按GB/T5750.12-2006中2.1.5条，取10 mL水样5份分别接种到5份10 mL双料乳糖蛋白胨培养液中，将接种管置于36 ℃±1 ℃培养24h±2h观察结果，如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则继续往下鉴定。 1.3.3耐热大肠菌群：按GB/T5750.12-2006中3.1.5条，自总大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管中取1滴转种于EC培养基中， 置44.5 ℃隔水式恒温培养箱内（水浴箱的水面应高于试管中培养基液面），陪养24 h±2h，如所有管均不产气则报告耐热大肠菌群阴性；如有产气者，划线接种伊红美兰平板，于44.5 ℃培养18h～24 h，查看菌落特征，有典型菌落者，即耐热大肠菌群阳性，根据阳性管数查表2（MPN检索表），报告每100 mL水样中耐热大肠菌群最可能数MPN值。 2、结果 本次调查是对已进行供水的饮水工程进行采样检测，共259份水样。 3、讨论 从本次调查的结果来看，我省农村饮水工程水质微生物污染状况比较严重，259份水样的检测中，细菌总数、总大肠菌群和耐热大肠菌群单项合格率分别为89.2%、50.2%和56.8%。 菌落总数是指在被检样品的单位质量（g）、容积（ml）或表面积（cm2）内，在一定条件下培养后所生成的好氧细菌菌落的总数。而饮用水中菌落总数的测定和计算是指在营养琼脂培养基上，1ml水样经36 ℃±1 ℃培养48h后所生出来的总菌数（包括腐生和致病细菌），可反映出饮用水被微生物污染的情况。菌落总数越多，说明饮用水被微生物污染的程度越严重，卫生状况差，检出病原菌的几率大，因而对人体健康的威胁就大，因此菌数的高低是评定饮用水卫生质量的重要指标；大肠菌群系指一群好氧及兼性厌氧，在36 ℃±1 ℃经24h±2h能发酵乳糖产酸、产气的革兰氏阴性无牙孢的小杆菌。它的检出标志着饮用水受粪便的近期和远期污染，是卫生质量评价的指标菌；耐热大肠菌群指的是具有某一些特性的一群细菌，与总大肠菌群相比，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且由于在自然界容易死亡等原因，耐热大肠菌群的存在可认为饮用水直接或间接的受到了比较近期的粪便污染。因而耐热大肠菌群的检出，与大肠菌群相比，说明饮用水更为不清洁，肠道致病菌和中毒菌的可能性更大。故其更能贴切地反映饮用水受人和动物粪便污染的程度。 众所周知，水与人们的生活息息相关，饮用水水质的状况直接关系到人们的身体健康。饮用水不应含有病原菌，污染病原菌的水除可引起中毒外，还引起传染病的发生。有报道称[1]2003年西藏山南地区扎囊县吉如乡小学饮用水受到微生物污染造成细菌性痢疾暴发流行。[2]1990 ～ 1994 年江苏省有75%伤寒暴发由水污染引起。钟学峰[3] 报道的伤寒水型暴发流行， 以及陈忠良[4] 报道的水型腹泻暴发流行就是因为饮用水水源分别受伤寒病