第3章培养基1-dong.pptVIP

第三章、培养基 第一节 培养基的种类及成分 第二节 培养基的配制 第三节 常用培养基的配方 第四节 培养基的选择 培养基是植物组织培养的重要基质。 在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官。 第一节 培养基的种类和成分 1、根据态相不同，培养基可分为固体培养基与液体培养基。区别是在培养基中是否添加了凝固剂。2、根据培养阶段不同，可分为初代培养基、继代培养基。3、根据培养进程和培养基的作用不同，培养基分为诱导(启动)培养基、增殖(扩繁)培养基及壮苗生根培养基。4、根据其营养水平不同，分为基本培养基和完全培养基。基本培养基即平常所说的培养基，如MS、White培养基。完全培养基由基本培养基和添加适宜的激素和有机附加物组成。对培养基的某些成分进行改良而成的培养基称为改良培养基。 3.1 培养基的种类和成分 二、培养基的成分 （一）水 水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。 配制培养基母液时要用蒸馏水或者去离子水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止储藏过程发霉变质。大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。 二、培养基的成分 （二）无机营养成分 无机营养成分就是人们平常所说的矿物质、无机盐或无机元素。它们在植物生活中具有非常重要的作用。 如氮（N）、硫（S）、磷（P）是蛋白质、氨基酸、核酸和许多生物催化剂即酶的主要或重要组分。它们与蛋白质、氨基酸、核酸和酶的结构、功能、活性等有直接的不可缺少的关系。 已知 12 种元素，即氮、磷、硫、钙、钾、镁、铁、锰、铜、锌、硼和钼。根据植物对这些元素需要量的不同或者根据目前植物培养基中添加的这些元素量的大小，可将它们分成大量元素和微量元素。 大量元素一般指在培养基中的浓度大于0.5mmol/L的元素（或﹥100mg/L）。 微量元素 指小于0.5mmol/L的元素 （或﹤100mg/L）。 培养基的成分—— 大量元素 1. 大量元素 主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种。 (1) N 是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占首要地位，又称生命元素。 一般以硝态氮（NO3-N)或氨态氮（NH4-N)两种形式存在。大多数培养基既含有硝态氮（NO3-)又含有氨态氮（NH4+)。氨态氮（NH4-N)对植物生长较为有利。供应的物质有KNO3、NH4NO3等。有时，也添加氨基酸来补充氮素。 缺氮时某些植物的愈伤组织会出现一种很引人注目的花色素苷的颜色，愈伤组织内部不能形成导管。 培养基的成分—— 大量元素 (2) P 是磷脂的主要成分。而磷脂又是原生质、细胞核的重要组成部分。磷也是ATP、ADP等的组成成分。 在植物组织培养过程中，向培养基内添加磷，不仅增加养分、提供能量，而且也促进对N的吸收，增加蛋白质在植物体中的积累。 常用的物质有KH2P04或NaH2P04等。 缺磷植株生长缓慢，老叶暗紫色，愈伤组织表现出极其蓬松状态。 培养基的成分—— 大量元素 (3) K 对于参与体内各种重要反应的酶起着活化剂的作用。 K增加时，蛋白质合成增加，维管束、纤维组织发达，对胚的分化有促进作用。但浓度不宜过大，一般为1-3mg／L为好。 制备培养基时，常以KCl、KNO3等盐类形式提供。 培养基的成分—— 大量元素 (4) Mg、S Mg 是叶绿素的组成成分，是激酶的活化剂；也是染色体的组成成分，在细胞分裂过程中起作用； S是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。 。 常以MgS04·7H20提供。 用量为1-3mg／L较为适宜； 缺硫时培养的植物组织会明显的退绿； 培养基的成分—— 大量元素 (5) Ca Ca是构成细胞壁的成分，Ca对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用；缺钙时细胞分裂受到影响，细胞壁形成受阻，严重时幼芽、幼根会溃烂坏死。 现代生物学研究还证明钙是植物体内的信号分子（信使）之一，在植物信号转导中发挥重要作用，钙离子与钙调蛋白结合形成的Ca2+·CaM复合体，能活化各种酶，调节植物对外界环境的反应与应答过程。 常以CaCl2·