临床微生物SOP-脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程.docVIP

1.目的 规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。 2．适用范围 脓液培养或涂片检查。 3．标本 3.1 标本类型 脓液。 3.2标本采集 3.2.1开放性脓肿和脓性分泌物 用无菌盐水或75%酒精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡深处采集2支拭子，1支为涂片检查用，1支作培养用。 3.2.2大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。 3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或黏膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。 3.3 标本拒收标准 3.3.1 标本标识与化验申请单不符。 3.3.2 标本不是无菌留取。 3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2小时。 4．试剂、仪器 4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3 %过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化 试剂等。 4.2VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。 4.3接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。 5．细菌鉴定和药敏质控 参见《质量管理程序》。 6．检验步骤 接收标本后，立即对标本进行编号、登记。 6.1 涂片检查 革兰染色镜检，报告“查见革兰×性菌，形似××菌，或报告“未查见细菌”。 6.2培养 6.2.1 一般细菌培养 标本接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板（或EMB、中国蓝琼脂平板），35℃培养18～24小时后，根据菌落特性和形态染色，作出初步判断，再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。 6.2.2厌氧菌培养 取脓液标本接种厌氧血琼脂平板及其他厌氧选择平板，置于厌氧环境培养，根据生长情况及涂片染色结果，按厌氧菌生物学特性进行鉴定。 6.2.3 嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平板，置5 %～10%C02环境中培养。 6.2.4 结核分枝杆菌培养 参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。 6.2.5 真菌培养 可用沙氏培养基。 7．操作流程 8．结果报告 查见致病菌，报告菌名和药敏结果。 9．注意事项 9.1 对于某些特殊病人（如气性坏疽病人），在菌种鉴定及药敏试验结果尚未报出之前，根据涂片镜检情况，采取治疗措施。 9.2 厌氧菌培养取得样本后，拭子应立即置于厌氧运送管，尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接抽取，避免接触环境中氧气。 10．临床意义 从脓液及创伤标本中能检出的病原微生物种类很多，最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染，包括有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮、外科切口及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌中，除上述细菌外，主要为结核分枝杆菌。脓性标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等，常为继发感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌，其次为水肿梭菌、败毒梭菌及溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌或其他需氧菌感染。器官脓肿和机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。 11.危急值报告 培养出产气荚膜梭菌及时按传染病报告。 参考文献 [1] 中国合格评定国家认可委员会．CNAS - GL23：2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南．2008 [2] 周庭银编著．临床微生物学诊断与图解，第二版，上海：上海科学技术出版社,2007 [3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编．全国临床检验操作规程，第三版．南京：东南大学出版社.2006 [4] Murray PR. Manual 0/F Clinical Microbilogy.9th ed. Washington：ASM Press, 2007 IS0 15189：2007 2007 编写人签名 复审人签名 审批人签名 生效日期 姓 名：XX 编写日期:2011-05 姓 名：XXX 复审日期：2011-06 姓 名：XXX 批准日期：2011-06 2011-07 XXXX医院检验科 微生物实验室 脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程 编号：MYCH/ 版本：第1版 第0次修改 页数：第 1 页 共 4 页 脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程 脓液及创伤感染分泌物 需氧培养 血琼脂平板、麦康凯平板， 35℃培养18-24h 观察菌落特征及涂片、染色涂片 仪器或手工细菌鉴定及药敏试验