制药企业必备-微生物知识.ppt

无菌操作室应达到GMP的规定，为达无菌的要求可采取综合措施： 应采用层流洁净空气技术； 可采用化学气体灭菌法进行空气环境灭菌； 室内用具、墙、桌等暴露面用消毒剂喷、擦消毒； 其他物品可热压灭菌； 操作人员衣、帽、鞋、手等消毒及灭菌 无菌操作室应定期进行菌落检查。 五、制药用水 （一）制备工艺 原水：石英砂过滤 活性炭过滤 软化 去除大颗粒、有机物和氯、去除多价阳离子，预防结垢，去除残留有机物 反渗透：去除颗粒，细菌，热原，部分有机物，无机离子和硅 去离子：去除无机离子，硅，二氧化碳和一些有机物 多效蒸馏：去除颗粒，细菌，热原，非挥发性有机物，无机离子和硅，用以制备注射用水 (二) 水系统微生物污染的来源 1. 原料水 2. 外源性污染 外源性污染主要指来自于水系统外部的原因对系统造成的污染，例如： ①系统未与外界空气隔绝 ②管道的连接泄漏 ③储罐上的呼吸口未使用过滤器 ④过滤器泄漏 ⑤倒流污染，如出水口污染后发生倒流 ⑥维护和维修后，如更换活性炭和树脂的颗粒残留 3. 内源性污染 内源性污染是指水系统的各设备单元本身造成的微生物污染。 ①设备对微生物的吸附并形成生物膜，如活性炭，离子交换树脂，过滤器膜等 ②配水管道的内表面、阀门等附着微生物 4. 细菌性热原污染 热原是指可能致热的微生物的代谢产物 外源性和内源性污染都可能导致热原污染 革兰氏阴性杆菌存在于细胞壁外壁层上的内毒素－磷脂多糖与蛋白质的复合物－是热原反应的主要因素。 （三）水系统控制微生物的手段 1. 物理消毒法：热消毒法（蒸汽灭菌）、紫外辐射 2. 化学消毒法：一般采用氧化剂，如臭氧 3. 活性炭过滤器：是微生物生长的“温床”。控制手段：保持合适的压力和流速；经常反洗；定期更换滤芯。 4. 储存分配系统的微生物控制：预防为主，消毒、灭菌为辅，强调设计和日常监控。 5. 反渗透装置的微生物控制：定期清洁消毒，采用温和的消毒剂；采用多级串联或并联，提高水的处理能力。 6. 离子交换装置的微生物控制：采用循环回路；确保水的流速；消毒；适当增加再生频率。 小 结 微生物无处不在 微生物控制靠每个工序 工艺中除微生物的方法有一定的限度 热原与无菌 3．温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般细菌最适温度为30~40℃，真菌为20~30℃。细胞生长的温度极限为-7℃～90℃。 各类细菌对温度的要求不同，可分为嗜冷菌（Psychrophiles）,最适生长温度为（10℃～20℃）；嗜温菌（Mesophiles）,20℃～40℃;嗜热菌（Thermophiles）,在高至56℃～60℃生长最好。病原菌均为嗜温菌，最适温度为人体的体温，即37℃，故实验室一般采用37℃培养细菌。 有些嗜温菌低温下也可生长繁殖，如5℃冰箱内，金黄色葡萄球菌缓慢生长释放毒素，故食用过夜冰箱冷存食物，可致食物中毒。 4．氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁殖。一般细菌代谢中都需CO2，但大多数细菌自身代谢所产生的CO2即可满足需要。有些细菌，如脑膜炎双球菌在初次分离时需要较高浓度的CO2（5～10%），否则生长很差甚至不能生长。 5．渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓度的盐溶液或糖溶液、40%甘油）中，细胞会脱水并停止生长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（10~15%）条件下才生长。 6．表面张力：表面活性剂可降低表面张力，它是影响细菌生长的因素之一。很多革兰氏阴性菌，特别是大肠菌群可很好地在表面活性剂包围的介质中生长，而大多数革兰氏阳性菌在表面张力低时（0.05N/m）不能很好生长。阳离子表面活性剂对很多有机体有毒性，阴离子表面活性剂毒性很小，非离子表面活性剂几乎没有毒性，并可成为某些微生物的营养物。 四、微生物的产物 1．热原（Pyrogen）:热原即菌体中的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故名热原。 热原耐高热，高压蒸汽灭菌（121℃，20’）不能使其破坏，加热（180-200℃2h;250℃以上30-45;650℃1）才使热原失去作用。热原可通过一般细菌滤器，但没有挥发性，药液、水等被细菌污染后，即使高压灭菌或经滤过除菌仍可有热原存在，输注机体后可引起严重发热反应。生物制品或注射