川陈皮素体外对微管蛋白聚合的影响-中国中药杂志.PDFVIP

第３３卷第１８期 　　　 中国 中药杂 志 Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１８ ２００８年９月 　　　　　　　　　ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ　　　　　　　 Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８ 川陈皮素体外对微管蛋白聚合的影响  刘　义 ，吴科锋，李延平 （广东医学院广东天然药物研究与开发重点实验室，广东湛江５２４０２３） ［摘要］　目的：研究川陈皮素对微管蛋白聚合的抑制作用，探讨其抗肿瘤的可能机制。方法：在离体条件下， 将受试化合物加入到微管蛋白聚合解聚反应体系中，于３７℃，３５０ｎｍ下检测反应体系吸光度的变化。结果：川陈 －１ 皮素处理后反应体系的吸光度与对照组相比显著降低。在不同终浓度川陈皮素（５０，７５，１００，１２５ ｍｏｌ·Ｌ ） μ 的反应体系中，其对应的最高吸光度分别为：０１３０，０１０９，００８６，００７１；对微管蛋白聚合的抑制率分别为１６７％， ３０１％，４４９％，５４５％。提示它对微管蛋白聚合具有抑制作用。结论：川陈皮素能抑制体外微管蛋白聚合，这可能 是其发挥抗癌作用的可能机制。 ［关键词］　川陈皮素；微管蛋白；聚合 ［中图分类号］Ｒ２８５５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１８２１１３０４ 　　微管（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ）是存在于所有真核细胞中由 为国产分析纯。 微管蛋白（ｔｕｂｕｌｉｎ）组装成的长管状细胞器结构，通 １３　微管蛋白的分离纯化　参照文献［５，６］提取 过其亚单位的组装和去组装能改变其长度，对低温、 微管蛋白的方法略有改进。把刚屠宰的成年猪脑， 高压和秋水仙素敏感，是细胞骨架的主要结构成分 置于冰上去除脑膜、大血管并剪碎，用预冷的ＭＥＳ －１ －１ 之一。微管在细胞形态结构、细胞分裂和运动中起 缓冲液（ＭＥＳ０１ｍｏｌ·Ｌ ，ＥＧＴＡ０１ｍｍｏｌ·Ｌ ， －１ －１ 着重要作用。某些植物类抗癌药如秋水仙素、紫杉 ＡＴＰ１０ｍｍｏｌ·Ｌ ，ＭｇＣｌ０１ｍｏｌ·Ｌ ，用ＨＣｌ调 ２ 醇等就是通过影响微管蛋白的聚合解聚活性来破 ｐＨ６５）清洗２次，掏碎后制成匀浆。 坏微管组装与去组装的动态平衡，遏制肿瘤细胞的 将脑组织匀浆在４℃，１０５０００×ｇ条件下离心 有丝分裂从而发挥其抗癌作用。 １ｈ，取上清液，加入等体积的 ＭＥＳ聚合缓冲液 －１ －１ 枳实为芸香科酸橙 Ｃｉｔｕｓａｕｍｎｔｉｏｎ及其变种或 （ＭＥＳ０１ｍｍｏｌ·Ｌ ，ＥＧＴＡ１０ｍｍｏｌ·Ｌ ，ＡＴＰ －１ －１ 甜橙Ｃｓｉｎｅｎｓｉｓ的干燥幼果，具有行气、散结、化痰 １０ｍｍｏｌ·Ｌ ，ＭｇＣｌ０５ｍｍｏｌ·Ｌ ，丙三醇 ８０