微流体晶片连结质谱仪侦测在蛋白质分析上的应用-MBL-微流体生医.PDFVIP

微流體晶片連結質譜儀偵測在蛋白質分析上的應用 陳邦維、李國賓、林中源、陳淑慧、宋旺洲、廖寶琦 國立成功大學環境醫學研究所、工程科學系、化學系 一、摘要 轉換與搜尋，加速對蛋白質的鑑別能力。 本 文 介 紹 以 微 機 電 系 統 然而分析蛋白質在技術上易遭遇到樣品量 （Micro-Electro-Mechanical-Systems, MEMS ）製 稀少、流程繁瑣等問題，微機電系統(MEMS) 程技術研製以石英與高分子聚合物為基材所製 加工技術可整合各式微元件（例如微管道、微 作的微型全分析系統（Micro Total Analytical 過濾器、微幫浦、微致動器、微閥門、微感測 System）晶片，運用電噴灑離子化（Electrospray 器及微反應器等）集中製作於晶片上，提供樣 Ionization, ESI ）技術連結質譜儀偵測進行生物 品混合、前處理、分離、偵測等功能。這樣具 樣品中蛋白質的分析。 有微型化與系統整合能力的微流體晶片稱為 「微型全分析系統」（Micro Total Analytical 二 、蛋白質分析與微型全分析系統 System ），或有人稱之為「晶片上的實驗室」 近年來生物醫學在基因技術上的蓬勃發展 （lab-on-a-chip ），即可有效的降低樣品在實驗 對於疾病探討有極大的助益，但鑑於蛋白質才 流程轉移中的損失與降低人工操作的實驗誤 是在生物體中發揮生理功能的單位，且基因在 差、提高系統穩定性、降低樣品需求量、節省 藉由轉錄成 mRNA 再轉譯成蛋白質過程中皆有 人力和縮短時間。 可能產生序列的易位重排，造成同段基因有潛 力產生不只一種蛋白質，所以現今對於有系統 三、微電噴灑離子化法質譜儀偵測技術 的直接分析生物體內所有由基因表現出的蛋白 電噴灑離子化法（Electrospray Ionization, 質(proteome)之技術需求皆與日遽增，這系統技 ESI ）是一種直接將溶液中的極性分子在大氣壓 術 整 體 的 發 展 稱 為 『 蛋 白 質 體 學 』 力下經由電噴灑的過程轉換為氣相離子以供質 （proteomics ）；而運用質譜偵測技術在得到蛋 譜儀進行偵測的技術，其過程如下，見（圖一）： 白質化學的結構訊息上，其重要性已日趨明 在正離子的偵測模式下（positive mold ），當溶 顯，即質譜偵測可以提供精確的蛋白質分子量 液達管道的出口端時提供其高正電壓，讓溶液 測定、氨基酸序列分析、轉譯後蛋白質修飾 部份解離且迫使正離子受到電場排斥而分佈於 （post-translational protein modification）鑑定、 管道出口端的液面上；逐漸提高電壓後，會讓 及研究蛋白質與蛋白質或其他類分子間的非共 正離子賦予強大的電場排斥力而將原本因表面 價相互作用（non-covalent interaction）。 張力形成的球型液面推成圓椎型；當排斥力大 另一方面，人類基因計畫已趨近完備則提 於表面張力時，尖端液面即遭到突破而形成含 供了另一項選擇，完整的基因資料庫包含了所 正離子居多的帶電荷液滴，這即稱為電噴灑 有可能的蛋白質序列，結合質譜技術，可幫助 （electrospray, ES ），其中穩定產生噴灑的椎型 搜尋蛋白質在基因序列上的比對，有助於探討