第45讲生物技术在其他方面的应用考纲要求1植物的组织培养2.DOC

第45讲　生物技术在其他方面的应用 [考纲要求]　1.植物的组织培养。2.PCR技术的基本操作和应用。3.蛋白质的提取和分离。4.从生物材料中提取某些特定的成分。5.实验：DNA的粗提取与鉴定。 考点一　植物组织培养 1．植物组织培养的过程 外植体愈伤组织幼苗―→移栽 植物组织培养常用的培养基是MS培养基，一般需要添加生长素和细胞分裂素两种植物激素。 2．植物组织培养的实验操作 (1)菊花的组织培养过程 制备MS培养基(配制母液、配制培养基、灭菌)→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。 (2)月季的花药培养过程 过程：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→鉴定和筛选。 影响花药培养的因素主要有材料的选择和培养基的组成。 要挑选完全未开放的花蕾，确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。 3．影响植物组织培养的因素 (1)菊花的组织培养，一般选择开花植株的茎上部新萌生的侧枝(　×　) (2)植物激素的浓度可影响细胞分化，但使用的先后顺序及比例不影响组织培养的过程(　×　) (3)pH、温度和光照等也影响植物组织培养(　√　) 易错警示　实验操作中易错的几个问题 (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季的花药培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照；而在后期均需光照。 1．植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回答相关问题： (1)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。一般来说，在____________期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择____________的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有____________法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用____________法，该法能将花粉细胞核染成____________色。 (2)若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的____________作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的____________和____________过程。 (3)进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加____________、____________等植物激素。欲有利于根的分化，植物激素的用量比例应为________________________________________________________________________。 (4)不同植物的组织培养除需营养和激素外，____________________________等外界条件也很重要。 (5)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是____________，采用灼烧方法进行灭菌的是____________。(填序号) 培养皿　培养基　实验操作的双手　三角锥形瓶接种环　花蕾 答案　(1)单核靠边　完全未开放　醋酸洋红　焙花青—铬矾　蓝黑　(2)茎尖分生组织　脱分化(或去分化)　再分化(3)生长素　细胞分裂素(两空顺序可以颠倒)　生长素多于细胞分裂素　(4)pH、温度和光照　(5)　 解析　(1)早期的花药比后期的更容易培养成功。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。该时期的花药通常存在于完全未开放的花蕾中。(2)根尖、茎尖约0～0.1 mm区域中几乎不含病毒。病毒通过维管系统移动，而分生组织中不存在维管系统，且茎尖分生组织中，代谢活力高，竞争中病毒复制处于劣势。(3)生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化。当生长素含量多于细胞分裂素含量时，利于生根。(4)植物培养时，除需要营养、激素外，还需要适宜的温度、pH和光照等。(5)对实验器具进行灭菌处理，对实验过程中的具有生物活性的材料或用具进行消毒处理。 1．植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同 　　 项目 内容　　 菊花的组织培养 月季的花药培养 理论依据 植物细胞的全能性 基本过程 脱分化→再分化 外植体的细胞类型 体细胞 生殖细胞 操作流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育影响因素 选材、营养、植物激素、pH、温度、阳光等培养结果 正常植株 单倍体植株 生殖方式 无性生殖 有性生殖可育性 可育 高度不育，秋水仙素处理后可育 2．植物激素与组织培养 (1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点： 在生长素存