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蛋白类活性物质研究及应用 韩曜平 导师群：108363643 管理员：韩曜平 手机要求：各位同学加入，真名、专业班级、联系方式等信息要有。 拟放一些学习材料，可提问题。 内容 1.生物活性物质概述 2.蛋白类活性物质 2.1 概述 2.2活性多肽：抗菌肽、谷胱甘肽 2.3 活性蛋白：蛋白酶抑制剂、溶菌酶 3.蛋白类活性物质的研究方法及手段 3.1研究的技术路线及方案 3.2分离纯化 3.3 活性鉴定 3.4 基因克隆 1.生物活性物质概述 1.1 概念 1、定义：多种具有生物活性的化合物，当与机体作用后能引起各种生物效应，称为生物活性物质。它们种类繁多，有糖类、脂类、蛋白质多肽类、甾醇类、生物硷、甙类、挥发油等等。对人有的有利，有的有害。 1.2 生物活性物质的分类 根据化学成分可分为 肽及蛋白质类 低聚糖类 核苷酸类 氨基酸衍生类 维生素类 脂肪酸衍生类 1.2.1 肽及蛋白质类 （一）肽类 1 谷胱甘肽(glutathione, GSH) 2.促甲状腺释放激素 3.神经肽(neuropeptide） 4.抗菌肽（antimicrobial peptides ，AMPs） （二）蛋白质类（ 较多） 如下丘脑激素，垂体激素，甲状旁腺素，胃肠激素。降钙素 谷胱甘肽 促甲状腺释放激素 1.2.2 氨基酸衍生类 1. 酪氨酸衍生物 儿茶酚胺 ： --多巴，多巴胺，去甲肾上腺素，肾上腺素 甲状腺素 2. 半光氨酸衍生物 3’-磷酸腺苷5’磷酸硫酸（PAPS) 牛蟥酸 1.2.3 脂类 1.2.4 磷脂 磷脂：磷酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、神经鞘磷脂（SPM）等磷脂类生物活性物质，是构成脑细胞和神经递质的重要成分，对大脑发育、加深记忆、提高智力、预防脑功能衰退有重要作用 1.2.5 糖类 双歧杆菌活化因子：乳中含有的低聚糖（低聚半乳糖、低聚果糖、低聚麦芽糖等）对人乳特有的N—乙酰氨基葡萄糖促进双歧杆菌的增殖，从而抑制大肠菌及腐败菌的生长，增强肠道蠕动，合成部分B族维生素，提高免疫力。目前，国内外已有添加各种双歧杆菌活化因子的乳制 ?? 糖脂：乳中含有神经节苷脂、神经酰胺等糖脂尖生物活性物质，对大脑及神经发育、记忆力起重要作用，神经节苷脂还具有抗毒作用。 2.蛋白类活性物质 2.1 概述 2.2 生物活性肽 2.3 活性蛋白的基本概念及应用 按生物化学理论，所有蛋白质(无论植物蛋白抑或动物蛋白)均由氨基酸分子以肽链连接在一 起。绝大多数蛋白质由300个以上氨基酸分子组成．而已知氨基酸种类在2O种以上，故蛋白质的种类十分复杂。科学家将氨基酸数量低于10个(分子量1000D以下)称为寡肽，10—100个(分子量1000D—10000D)的生化物质称之为“多肽”(polypeptides)，反之高于 100个(分子量10000D以上)氨基酸分子的物质为蛋白质(proteins)。 2.2 生物活性肽 一、生物活性肽的概念（简称活性肽） 活性肽的概念：分子量10000D，具有生物活性。 生物活性肽（bioactive peptides）是指一类天然存在于动植物和微生物等生物体内，由2个或2个以上氨基酸组成的，具有生物活性的长链状或环状多肽，而且常经过糖苷化、磷酸化或酰化衍生，它们在细胞生理及代谢功能的调节方面具有重要的作用。 这些活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，食用安全性极高。 天然肽的来源： 多肽类化合物在自然界中广泛存在，天然产物中已知的活性多肽主要是由分泌细胞、内分泌腺组织、体液或胞质中产生获得的。体外可通过基因工程、噬菌体展示技术或人工化学合成的方法获得。 人体中的来源： 人体多肽物质来源于蛋白质营养，主要是两个方面，一是食物在消化过程中蛋白质产生多肽，被身体吸收，二是体内细胞利用蛋白质的降解物氨基酸直接合成。 人们对肽的认识 错误观念：长期以来人们一直认为，蛋白质降解成寡肽后，只有再降解为游离氨基酸才能被动物吸收利用。 20世纪60年代，有研究证明寡肽可以被完整吸收。 此后，大量的研究表明：动物体内可能存在多种寡肽的转运体系。 目前的研究认为：二、三肽能被完整吸收，大于三肽的寡肽能否被完整吸收还不确定，但也有研究发现四肽、五肽甚至六肽都能被动物直接吸收。 二、生物活性肽的的生理功能 调节体内的水分、电解质平衡； 制造对抗细菌和感染的抗体，提高免疫功能； 促进伤口愈合； 在体内制造酵素（酶），有助于将食物转化为能量； 修复细胞，改善细胞代谢，防止细胞变性：防癌作用； 促进蛋白质、酶、酵素的合成与调控； 沟通细胞间、器官间信息的重要化学信使； 预防心脑血管疾病； 调节内分泌与神经系统； 改善消化系统、