原创力文档- 1、本文档共6页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
家蚕细胞自噬相关蛋白BmATG8的多克隆抗体制备与组织表达分析
Science of Sericulture 蚕业科学
2014 ，40 (5):0818 － 0823
ISSN 0257 － 4799 ;CN 32 － 1115 / S
E-mail :CYKE@ chinajournal． net． cn
家蚕细胞自噬相关蛋白 BmATG8 的多克隆抗体制备与组织
表达分析
1 1 1 2 1 1 1
杨晓冰 李洪建 吴永鹏 刘庆洪 张敏娟 钱永华 焦 锋
1 2
( ， 7 12100 ; ， 100 193)
西北农林科技大学蚕桑丝绸研究所 陕西杨凌 中国农业大学生物学院 北京
， 、 、 、 。
摘 要 自噬是细胞固有的一种降解机制在生物体的生长 发育以及感染免疫 衰老 死亡等过程中发挥重要作用 进行家
， 5 5
蚕细胞自噬相关蛋白基因的克隆和重组蛋白表达 分析细胞自噬相关蛋白在 龄幼虫不同组织的表达水平和同一组织中随
， 。 GenBank
龄发育时间的表达变化 有助于从分子水平了解家蚕细胞自噬的功能 根据 登录的家蚕细胞自噬相关蛋白基因
Atg8 (BmAtg8) ， 5 cDNA BmAtg8 354 bp ，
的序列设计引物 以家蚕 龄幼虫中肠 为模板克隆了 的 编码区序列 并成功将其连入
pET32a (+ ) 。 E. coli Ｒosseta BmATG8 ，
质粒中 将重组质粒转化 菌株继而诱导表达重组 蛋白 将该蛋白质纯化后强化免疫新西
兰大白兔3 ， 1∶ 512 000 。 ， BmATG8
次 获得效价达 的多克隆抗血清 以此多克隆抗体杂交家蚕组织总蛋白 检测到 及其与磷脂
BmATG8-PE 2 。Western BmATG8 5 2 、
酰乙醇胺偶联的 条免疫印迹条带 杂交表明 蛋白在家蚕 龄第 天幼虫丝腺 中肠和脂肪体
， 5 1 ～ 2 7 ～ 8 ， 5 3 2
中的表达水平较高 其中在 龄第 天和第 天丝腺组
文档评论（0）