六神丸含服对炎性和神经病理性疼痛的治疗作用.docVIP

六神丸含服对炎性和神经病理性疼痛的治疗作用 　　摘要：为探究六神丸含服对炎性和神经病理性疼痛的治疗作用，将90只昆明小鼠，按时间点（1/3 h， 1 h， 6 h）随机分成3组每组分别设模型组、吗啡治疗组（10 mg/kg/d，腹腔注射）、双氯酚酸钠治疗组（15 mg/kg/d；灌胃）、六神丸低高剂量组（2.812 mg/kg/d、14.06 mg/kg/d；含服），于给药1/3 h、1 h、6 h后腹腔注射0.6%醋酸溶液，观察了各组小鼠30 min内的扭体次数.另将15只雄性SD大鼠，给予紫杉醇（8 mg/kg/3d）建立神经病理性疼痛模型并随机均分为模型组、六神丸治疗组，分别在0、2、4、6、12 d后检测了1.875 mg/kg/d六神丸治疗后大鼠的热、冷和机械痛阈值和肝组织HE染色。结果表明：2.812 mg/kg/d的六神丸能抑制醋酸引起的炎性疼痛，在体内的作用时间持久；1.875 mg/kg/d六神丸含服给药能明显降低紫杉醇导致大鼠的热、冷和机械痛?值，明显改善紫杉醇导致的大鼠肝脏损伤，减少肝脏炎症。因此少量的六神丸含服有助于缓解炎性疼痛和神经病理性疼痛。 　　关键词：镇痛；六神丸；神经性病理性疼痛 　　中图分类号：R285.5 　　文献标识码：A 文章编号2017 　　1 引言 　　六神丸是由牛黄、蟾酥、雄黄、麝香、珍珠和冰片六味中药配制而成的百年传承神药。其具有清热解毒、消肿止痛和敛疮生肌之功效，主要用于烂喉丹痧，喉风乳蛾，咽喉肿痈及痈疽疔疮等症[1]。研究发现灌服大于50 mg/kg的六神丸对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有抑制作用，能减轻甲醛致大鼠足跖肿胀；减少醋酸所致小鼠扭体次数，延长扭体潜伏期[2]，对炎性疼痛有很好的治疗作用。药理研究实验室在前期研究中发现低剂量（10 μg/ml）的六神丸有较好的抗癌活性[3]，能有效抑制癌细胞的生存。因此，在综合了大量文献和实验室前期的研究基础上，采用含服给药方式，降低了六神丸的给药剂量，研究了不同给药时间对醋酸引起的炎性疼痛和化疗药物导致的神经病理性疼痛的改善效果，为其临床抗癌镇痛的应用提供科学依据。 　　2 实验部分 　　2.1 试剂与仪器 　　六神丸（上海雷允上公司），双氯芬酸钠、伊红、冰醋酸（Sigma），盐酸吗啡注射液（批号东北制药集团沈阳第一制药厂），紫杉醇注射液（批号海口市制药厂有限公司），苏木精（南京建成）；。足底测痛仪（美国Ugo Basile），手持式测痛仪（北京硕林苑科技有限公司），铁架台。 　　SPF级昆明小鼠由湖北省实验动物研究中心提供，体重20～25 g，雄性；SPF级SD大鼠由湖北省实验动物研究中心提供，体重200～250 g，雄性，许可证号SCXK（鄂）2008-0005。 　　2.2 方法 　　2.2.1 动物分组 　　动物的饲养环境为温度22～25℃，湿度30%～40%。小鼠适应性饲养5d后，将90只小鼠按时间点随机分成3大组，每组30只：①1/3 h组；②1 h组；③6 h组；每大组再均分成5个小组，每组6只：①模型组；②吗啡治疗组；③双氯芬酸钠治疗组；④六神丸低剂量治疗组；⑤六神丸高剂量治疗组。大鼠适应性饲养5d后，将15只大鼠随机分成3组，每组5只：①对照组；②模型组；③六神丸治疗组。所有动物实验和处理均遵照“Guide for the Care and Use of Laboratory Animals：实验动物的护理和使用指南”[4]。 　　2.2.2 动物模型的建立 　　（1）扭体模型的建立：小鼠进行醋酸致扭体模型的建立，给药后1/3 h、1 h、6 h，动物逐一腹腔注射0.6%醋酸10 mL/kg，观察并记录各组小鼠30 min内的扭体次数。 　　（2）神经性病理性疼痛的建立：造模开始前分别检测各组大鼠的热痛阈值、机械痛阈值和冷痛阈值，各组大鼠（对照组注射等剂量的生理盐水）注射8 mg/（kg?3d）紫杉醇溶液，诱导神经性病理性疼痛[5]。六神丸治疗组经口含服（将药物放入口腔中，待其在口腔中完全吸收后再放入笼中，并禁食禁水5 h）给予六神丸1.875 mg/（kg?d），其余各组不进行治疗。在造模后2、4、6、12 d检测各组大鼠足趾热痛阈值、冷痛阈值和机械痛阈值。12 d后取各组大鼠的肝脏进行HE染色； 　　2.2.3 六神丸醇提上清的制备 　　取六神丸颗粒240粒，置于研钵研成细粉末。将粉末全部转移至50 mL离心管中，加入42 mL无水乙醇进行溶解，放置1 d后得到醇提上清。将醇提上清冻干，保存于干燥器中备用，用时用麻油进行溶解。 　　2.2.4 醋酸小鼠扭体测试方法 　　阳性对照组灌胃给予15 mg/