第四章 质谱本科.ppt

第四章 质谱法 1、定义： 质谱法是通过对样品的分子电离后所产生离子的质荷比m/e 及其强度的测量来进行成分的结构分析的一种仪器分析方法。 2、质谱法的特点 （1）、信息量大，应用范围广，是研究有机化学和结构的有力工具。 （2）、由于分子离子峰可以提供样品分子的相对分子量的信息，所以质谱法也是测定分子量的常用方法。 （3）、分析速度快、灵敏度高、高分辨率的质谱仪可以提供分子或离子的精密测定。 （4）、质谱仪器较为精密，价格较贵，工作环境要求较高，给普及带来一定的限制。 3、应用： 样品元素组成； 无机、有机及生物分析的结构---结构不同，分子或原子碎片不同(质荷比不同)； 复杂混合物的定性定量分析------与色谱方法联用(GC-MS)； 固体表面结构和组成分析-----激光烧蚀等离子体---质谱联用； 样品中原子的同位素比。 第一节 质谱的基本知识 1、仪器简介 质谱计是一种测定带电离子质荷比的装置。 质 谱 仪 Agilent7500系列ICP-MS 2、基本原理 3.质谱的表示方法 一般的质谱给出的数据有两种形式： 棒图即质谱图 表格即质谱表。 质谱图是以质荷比(m/z)为横坐标，相对强度为纵坐标构成。一般将原始质谱图上最强的离子峰为基峰并定为相对强度为100%，其它离子峰以对基峰的相对百分值表示。 4、质谱仪的分辨率 分辨率（resolution）： 用10%分辨率（R）表示。 CO和N2的离子质荷比分别为：27.9949和28.0061 第二节 质谱电离过程 2、化学电离源(Chemical Ionization, CI) 样品分子在承受电子轰击前，被一种反应气(通常是甲烷)稀释，稀释比例约为103:1，因此样品分子与电子的碰撞几率极小，所生成的样品分子离子主要由反应气分子组成。 第二节 质谱电离过程 3、快原子轰击(Fast atom bombardment, FAB) 过程：高速电子轰击——惰性气体电离——电场加速——高速原子离子束——撞击涂有样品的金属板——能量转移给样品分子——样品分子电离——引入磁场分离。 EI与CI、FAB比较 EI：易于实现且图谱的重现性好，便于利用数据库实现计算机检索及图谱的对比；有较多与结构密切相关的碎片峰。 CI、FAB：电离能小，质谱峰数少，图谱简单；准分子离子峰(M+1)+或分子离子峰M+大,可提供分子量这一重要信息。 第二节 质谱电离过程 4、基质辅助激光解析电离（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI） 第二节 质谱电离过程 基质辅助激光解析电离（MALDI）的优点： 使一些难于电离的试样电离，且无明显的碎裂，适合生物大分子（肽类、核酸等），分子最测定可达300000u. 脉冲式激光，适合与飞行时间质谱计相配，谱中碎片离子少，有分子离子峰、准分子离子及试样分子聚集的多电荷离子。 第二节 质谱电离过程 5、大气压电离（Atmospheric Pressure Ionization，API） 主要应用于高效液相色谱和质谱计联机时的电离方法。 电离方法的选择 第三节 质谱分析器 质谱分析器的作用是将不同碎片按质荷比m/z分开。 质量分析器类型：磁分析器、四极杆、离子阱、飞行时间、离子回旋共振等。 1、磁分析器 单聚焦型(Magnetic sector spectrometer)：用一个扇形磁场进行质量分析的质谱仪。 2、四极质量分析器 结构简单，体积小，重量轻，清洗方便，操作容易 公用电场，无磁滞现象，扫描速度快，适合与色谱联机 真空度要求低，适合与液相色谱联机 分辨率不高，对较高质量的离子有质量歧视效应。 3、离子阱 过程：上下端罩与左右环电极构成可变电场——带电离子在一定轨道上旋转——改变电压——可使相同m/e离子依次离开进入电子倍增器而分离 4、傅立叶变换质谱法 离子回旋共振分析器(Ion cyclotron resonance, ICR) 5、飞行时间质谱计（Time Of Flight TOF-MS） 原理：用一个脉冲将离子源中的离子瞬间引出，经加速电压加速，它们具有相同的动能而进入漂移管，质荷比最小的离子具有最快的速度因而首先到达检测器，质荷比最大的离子则最后到达检测器 TOF质谱反射镜的设计原理 动能大的离子受到电场的作用力大，反之则小，使同质量、不同动能的离子同时到达检测器。 第四节 质谱中的主要离子 在质谱中主要出现四种离子 分子离子 碎片离子 同位素离子 亚稳离子 1、分子离子与分子量的确定