中国医科大基础医学生物化学课件 第十一章 RNA 生物合成 (转录).ppt

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中国医科大基础医学生物化学课件 第十一章 RNA 生物合成 (转录)

转录与复制的相似点:  1. 模板均为DNA;  2. 延长机理都是形成磷酸二酯键;  3. 方向均为5′→3′。  转录和复制的区别 第一节 转录的模板和酶 Templates of Transcription and Enzymes 一、转录模板    双链DNA分子中能作为模板转录出RNA的那条链,称为模板链。又叫有意义链(sense strand)或Watson链。    另一条互补链称为编码链,又叫反义链(antisense strand)或 Crick链。    转录产物RNA的碱基序列,除了 T 变U 外,其余与编码链相同。 不对称转录   (asymmetric transcription) 在DNA分子双链上某一区段,一股链可转录,另一股链不转录; 模板链并非永远在同一单链上。 二、RNA聚合酶(DDRP) 1. 原核生物的RNA聚合酶 E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的六聚体( ?2 ? ?? ??) E. coli RNA聚合酶组分   其他原核生物的RNA聚合酶,在结构、组成、功能上均与E.coli相似。   原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗 结核药利福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与RNA聚合酶的?亚基特异结合,从而影响酶的活性。 2. 真核生物的RNA聚合酶    RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都由多个 亚基组成。有些亚基是三种酶所共有。   mRNA是各种RNA中寿命最短、 最不稳定的,需经常重新合成。因此RNA聚合酶Ⅱ是三种酶中最活跃的。 三、酶与模板的辨认结合 原核生物一个转录区段可视为一个转录单位,称为操纵子(operon),包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。  RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子(promoter)。是调控转录的关键部位。 RNA聚合酶保护法 原核生物启动子 -35区:一致性序列为TTGACA 是RNA-pol的辨认位点 -10区:一致性序列为TATAAT 又叫Pribnow盒 是RNA-pol的结合位点 真核生物启动子 第二节 转录过程 The Process of Transcription 分为三个阶段: 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination) 一、原核生物的转录过程 (一)转录起始 1. RNA聚合酶结合在转录模板的起始区域。  2. DNA双链解开,以一条链为模板,合成第一个磷酸二酯键。 转录泡(transcription bubble): 在转录延长过程中,由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA三者结合在一起的复合体,为空泡状结构,又称转录复合物。 转录的起始及延长过程 (三) 转录终止   RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。         1. 依赖ρ因子的转录终止 ?因子是同六聚体蛋白; ?因子能结合RNA,与poly C的结合力最强; ?因子还有ATP酶和解螺旋酶的活性。 2. 不依赖ρ因子的转录终止  DNA模板上靠近终止处,有特殊的碱基序列,转录出RNA后,RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 二、真核生物的转录过程   参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ 第三节 真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification 一、mRNA的转录后加工 (一)首尾的修饰 1. 5′-端加帽:m7GpppG—— 2. 3′-端加尾:多聚腺苷酸 (poly A) 帽子结构   加帽过程 ? RNA编辑作用说明,基因的编码序列经过转录后加工,是可有多用途分化的,因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 核酶的发现,对中心法则作了重要补充; 核酶的发现是对传统酶学的挑战; 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 复习思考题: 1. 概念 (1)转录 (2)不对称转录 (3)结构基因 (4)核心酶 (5)外显子 (6)内含子 (7)模板链 (8)启

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