荧光染色法在结核分枝杆菌检测中的应用.pdfVIP

山东医药2014年第54卷第 7期 荧光染色法在结核分枝杆菌检测中的应用 张 立，周洪经，冯 爽 (天津市海河医院，天津300350) 摘要：目的 观察荧光染色法在肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的阳性率检测中的临床应用价值。方法 250例肺结核患者 ，收集深咯痰标本，每份痰标本涂抹2张玻片，分别采用荧光染色法 (荧光染色组)和抗酸染色法 (抗酸染色组)检测结核分枝杆菌，比较两组阳性率。结果 荧光染色组检出结核分枝杆菌阳性 lO9例，阳性率为 43．60％，其中(+)、(++)、(+++)、(++++)阳性率分别 占13．20％、11．60％、8．40％、lO．40％；抗酸染色组 阳性86例，阳性率为34．40％，其中(+)、(++)、(+++)、(++++)分别占6．80％、8．80％、8．00％、lO．80％。 两组总阳性率及 (+)阳性率比较P均O．Ol。与抗酸染色组比较，荧光染色组检测痰中结核杆菌的灵敏度 、特异 性均较高(P均0．05)。结论 荧光染色法检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌的阳性率高于抗酸染色法，且 差异主要体现在含菌量少的痰标本上，这对于那些病变活动性轻，排菌量较少的肺结核的诊断具有重要意义。 关键词：荧光染色；抗酸染色；抗酸杆菌；结核病 doi：10．3969~．issn．1002~66X．2014．07．020 中图分类号：t／521 文献标志码 ：B 文章编号：1002~66X(2014)07_o055-o3 目前，临床上对于结核病的诊断，临床多使用x 锰酸钾0．5g，溶于 100mL蒸馏水。抗酸染液的配 线、病理切片、痰涂片镜下检查、细菌培养等，但 x 制按照 “结核病诊断细菌学检验规则”进行。 线对无典型影像学表现患者有局限性；病理切片耗 1．3 痰涂片染色及观察方法 用竹签挑取标本的 时长；厚涂片抗酸染色法结果较为准确，长期用于确 脓样、血样或干酪样部分0．05～0．1mL于玻片正面 诊结核病，但镜检检出时间较长，阳性检出率较低 ， 的右侧 2／3中央处，并均匀涂抹成 1．0em×2．0em 无法满足临床需要。在常见的几种结核杆菌的检测 椭圆形痰膜，薄厚适中，室温下 自然干燥。将痰涂片 方法中，结核杆菌培养阳性率为25％～75％，PCR 进行染色和镜检。①染色方法：荧光染色组：将痰涂 检测结核杆菌 DNA阳性率为77％ ～90％，但这两 片用荧光染液染 10min，水洗后用5％的盐酸乙醇 种方法对实验室要求较高，在基层医院中难 以开 脱色 1—2min至外观无黄色为止，水洗后用反衬液 展 J。我们采用荧光染料盐基淡黄配制成荧光染 染 l～2min，水洗晾干待检。抗酸染色组：染色按 液，采用荧光染色法对250例肺结核患者痰标本进 “结核病诊断细菌学检验规程”进行。②镜检：荧光 行结核分枝杆菌检测，并与抗酸染色法对比，发现荧 染色组：已染好的涂片用 ZEISSPrimoStariLED荧 光染色法可显著提高阳性率。现报告如下。 光落射暗视野显微镜观察，以10×目镜、20×物镜 1 材料与方法 观察痰涂片，40×物镜检查细菌细胞形态。抗酸染 1．1 标本来源 痰标本来 自2012年 10月 ～2013 色组：染色好的痰涂片用 OLYMPUSCX21普通光 年6月天津市海河医院住院和门诊250例肺结核患 学显微镜 100×物镜观察。荧光染色和抗酸染色镜 者，这些患者均为初诊患者，经 X线、PPD试验、结 检时间和结果报告标准均以 “结核病诊断实验室检 核抗体检查等临床初步诊断为活动性肺结核。每位 验规程”为准。荧光染色结果报告：符合0条／50视 患者收集深咯痰标本，每份痰标本涂抹2张玻片，分