痕量维生素B3双水相萃取和荧光测定.doc

痕量维生素B3双水相萃取和荧光测定 　　【摘要】本文分析了聚乙二醇6000-硫酸铵双水相体系对维生素 B3的最佳萃取条件，并结合荧光法对其进行测定。且在最佳萃取条件下进行荧光扫描确定最佳激发/发射峰为 λex /em=319.0nm/392.0nm。聚乙二醇 6000-硫酸铵双水相体系对维生素B3的一次性萃取率在 91%～93%之间，线性范围8.0×10-6～2.0×10-4g/L，检出限为 1.3×10-7g/L。该方法萃取率高、线性范围宽、检出限低，可维生素B3的分析测定。 【关键词】双水相萃取；荧光法；维生素【Abstract】 【中图分类号】R927 【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2013）09-214-01 维生素B3又称尼克酸、烟酰胺、烟酸。维生素B3能促进血液循环，降低血压，降低胆固醇和甘油三酯，减轻胃肠障碍.减轻美尼尔综合症的症状等。在动物肝脏、肾脏、瘦肉、鱼卵、麦芽、全麦制品、花生、无花果等中富含维生素B3。在维生素B3含量测定的方法中，采用双水相萃取、荧光法测定维生素B3的所占比例很小。本文选用聚乙二醇6000-硫酸铵双水相萃取、荧光法测定维生素B3，达到提高灵敏度的目的，从而进一步完善了维生素的分析与测定，为双水相的运用拓展了范围。 1实验 1.1仪器和试剂：pHS-3C 数字型精密酸度计（上海虹益仪器厂）；荧光光度计FP-8500（日本岛津）；FA2004型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司） 维生素B3标准溶液6.0×10-4g/L（避光保存），聚乙二醇2000；聚乙二醇6000；氯化钠；硫酸钠；碳酸钠；磷酸二氢钠；硫酸铵；磷酸。聚乙二醇为化学纯，其余所用试剂均为分析纯。 1.2实验与方法：在60.0mL 的分液漏斗中依次加入聚乙二醇 6000 溶液（30%）6.0mL、磷酸-磷酸氢二钠缓冲液1.0mL、维生素B3标准溶液、硫酸铵1.0g、振荡1.5min、静置 8.0min，分离上下相，在 λex/λem=319.0nm/392.0nm 处测量上层水相中维生素B3的荧光值。将荧光值代入回归方程，计算维生素 B3的含量。 2结果与讨论 2.1荧光光谱：以荧光光度计 FP-8500（激发/发射缝宽 5nm/5nm）分别对维生素B3水溶液以及含有维生素B3的双水相进行扫描，结果显示，在聚乙二醇 6000～硫酸氨双水相体系中维生素B3的激发/发射峰并没有明显偏移，而维生素B3的荧光值在该体系中明显增强，这说明聚乙二醇 6000 对维生素B3具有富集作用。如图所示：A、A’--维生素B3水溶液 ，B、B’-双水相，由图可知，利用该体系测定维生素B3的最佳激发/发射波长为 λex /λem=319.0nm/392.0nm 【中图分类号】R927 【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2013）09-214-01 维生素B3又称尼克酸、烟酰胺、烟酸。维生素B3能促进血液循环，降低血压，降低胆固醇和甘油三酯，减轻胃肠障碍.减轻美尼尔综合症的症状等。在动物肝脏、肾脏、瘦肉、鱼卵、麦芽、全麦制品、花生、无花果等中富含维生素B3。在维生素B3含量测定的方法中，采用双水相萃取、荧光法测定维生素B3的所占比例很小。本文选用聚乙二醇6000-硫酸铵双水相萃取、荧光法测定维生素B3，达到提高灵敏度的目的，从而进一步完善了维生素的分析与测定，为双水相的运用拓展了范围。 1实验 1.1仪器和试剂：pHS-3C 数字型精密酸度计（上海虹益仪器厂）；荧光光度计FP-8500（日本岛津）；FA2004型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司） 维生素B3标准溶液6.0×10-4g/L（避光保存），聚乙二醇2000；聚乙二醇6000；氯化钠；硫酸钠；碳酸钠；磷酸二氢钠；硫酸铵；磷酸。聚乙二醇为化学纯，其余所用试剂均为分析纯。 1.2实验与方法：在60.0mL 的分液漏斗中依次加入聚乙二醇 6000 溶液（30%）6.0mL、磷酸-磷酸氢二钠缓冲液1.0mL、维生素B3标准溶液、硫酸铵1.0g、振荡1.5min、静置 8.0min，分离上下相，在 λex/λem=319.0nm/392.0nm 处测量上层水相中维生素B3的荧光值。将荧光值代入回归方程，计算维生素 B3的含量。 2结果与讨论 2.1荧光光谱：以荧光光度计 FP-8500（激发/发射缝宽 5nm/5nm）分别对维生素B3水溶液以及含有维生素B3的双水相进行扫描，结果显示，在聚乙二醇 6000～硫酸氨双水相体系中维生素B3的激发/发射峰并没有明显偏移，而维生素B3的荧光值在该体系中明显增强，这说明聚乙二醇 6000 对维生素B3具有富集作用。如图所示：A、A