实验室科研探究（清华大学）生物矿化的分子机理研究课件（34单元）.pptVIP

五、本项目的特色与创新之处 本研究工作将开拓我国珍珠形成基础理论研究的一个新领域。 基质蛋白P10和MSI7（ GRMP ）都是本课题组发现的新的基质蛋白，进一步阐明它们的结构及其在珍珠质生物矿化过程中的作用皆属于源头创新。 无定形碳酸钙结合蛋白（ACCBP）的研究工作在国际上尚处于起步阶段，阐明ACCBP在珍珠质形成过程中的作用，将是贝类来源ACCBP的首次报道。 钙代谢相关蛋白、合浦珠母贝外套膜组织来源的碳酸酐酶在珍珠质形成过程中的作用研究皆属于首创性的工作。 合浦珠母贝珍珠质生物矿化的细胞研究模型（原代培养细胞或细胞系）的建立将具有突破性意义。 总之，本项目已有很好的前期工作基础，选题新颖，拟实施的研究方案、技术路线切实可行，研究方法成熟。 项目组成员长期从事海洋生物化学与分子生物学方面的研究工作，拥有基因克隆与表达、蛋白质的分离纯化及性质研究、细胞培养和检测的先进实验条件和丰富经验。 项目组成员以博士研究生为主力，他们思维活跃、有很强的创新意识和开拓进取的精神，为本项目各项任务的顺利实施提供了保证。 可行性分析 相信在本课题组成员的共同努力下，一定能够完成预期的研究目标！ * 生物矿化研究正在成为一个新兴的前沿科学研究领域 ，是一个多学科交叉的研究领域，涉及化学、物理学、材料学、生物学和医学等多个学 科。 正因为如此，目前， 珍珠质的生物矿化研究工作已吸引了美国、日本、法国、以色列、中国等国众多科学家的参与。有关生物矿化的研究成果陆续在Nature、Science等杂志上得以报道。 国内相关的研究工作自90年代才开始起步，与国际同行存在较大的差 距。 * 我国是珍珠养殖大国，海水珍珠养殖业是我国南方水域养殖规模较大、效益较高，也是影响面较广的一种产业。它不仅包括珍珠养殖，而且包括珍珠的精细加工、综合开发利用和市场流通等，是广西、广东、海南一些地区的海洋经济及地方经济的支柱产业，其盛衰对于地方经济的发展、国家税收和农民的脱贫致富有着致关重要的作用。 然而，随着科技水平的不断提高和经济全球化的发展，曾经在国际上占优势的我国传统的珍珠养殖业正面临严俊的挑战，海水珍珠的产量和质量停滞不前，已沿用50多年的珍珠养殖技术、陈旧的生产模式和管养方式已明显不适应参与国际市场竞争的要求。据中国宝玉石协会的统计，2003年中国珍珠产量占全球95%，但产品销售收入却不到十分之一份额。尽管导致上述现象的原因是多方面的，但最根本的原因是养殖技术落后，珍珠质量差。所以，珍珠养殖业的现状也迫切需要新技术的指导和基础理论研究的突破。 * 外套膜是包围在贝类其他组织外面、紧贴在贝壳上的一层薄膜。 珍珠质基质蛋白是由产珠贝类的外套膜分泌的。 * 开发成为美容及骨修复医用生物材料 仿生工程材料和纳米材料 为其他类型的生物矿化机制的研究提供借鉴 为珍珠养殖业及相关产业的持续、稳定发展 提供理论指导 * 开发成为美容及骨修复医用生物材料 仿生工程材料和纳米材料 为其他类型的生物矿化机制的研究提供借鉴 为珍珠养殖业及相关产业的持续、稳定发展 提供理论指导 * * * * * * 从珍珠质中分离得到了一种分子量为10Kda的基质蛋白P10，具有刺激成骨细胞和成纤维细胞的生长的功能。 p10能提高CaCO3结晶的速度， 进一步分析p10存在条件下CaCO3结晶在显微镜下的晶体形貌（图1-8）和X-射线衍射谱（图1-9）表明，p10能促进CaCO3晶体在a、b轴方向上生长同时限制其在c轴方向上的生长，且独立地促使CaCO3晶体的晶型由方解石向文石转化。 * p10对成骨细胞MC3T3-E1的MTT活性和ALP活性的影响，还研究了其对另一种具有分化形成成骨细胞能力的成纤维细胞MRC-5的MTT活性和ALP活性的影响。 结果表明p10能显著提高两种细胞的MTT反应与碱性磷酸酶（ALP）活性，但对细胞总蛋白量影响不大，提示p10能促进细胞向骨细胞方向分化，但对细胞总体增殖的作用不明显。 * 其中GRMP编码的珍珠质基质蛋白GRMP（Glycine-rich matrix protein）与Nature（1997）报道的珍珠质基质蛋白MSI31具有很高同源性。GRMP的特点是分子量较小，但含有MSI31中结合钙离子的关键区域。原位杂交（In situ hybridization）实验表明，GRMP基因在合浦珠母贝外套膜的上皮细胞中特异表达，从而进一步证明GRMP是外套膜上皮细胞分泌的珍珠质基质蛋白，通过对该基因进行体外表达和体外碳酸钙结晶试验，证明GRMP影响碳酸钙的结晶形态与结晶速度，从而推断GRMP可能在碳酸钙的生物矿化过程中起十分重要的作用。 * * 在外套膜的三个褶的上表皮细胞中及其背