免疫和核酸纯化.pptVIP

法医样本DNA提取试剂盒 与国内同类试剂盒的比较 基于金磁微粒的化学发光磁酶免检测TP抗体 利用GoldMag?-AS微米金磁微粒与化学发光检测方法相结合，研制出高灵敏度，定量准确的磁酶免化学发光检测试剂盒。开发的梅毒抗体检测试剂盒，其灵敏度是现有商业化酶联免疫试剂盒的64倍，化学发光试剂盒的4倍。 化学发光磁酶免疫分析法与商品试剂盒灵敏度对比表 磁酶免化学发光检测试剂盒检测原理示意图 阳性血清稀释倍数 检 测 方 法 商业化酶联免疫试剂盒 商业化化学发光试剂盒 化学发光磁酶免法(金磁微粒法) 1:100 + + + 1:200 + + + 1:400 - + + 1:800 - + + 1:1600 - + + 1:3200 - + + 1:6400 - - + 1:12800 - - + 1:25600 - - + - 1:51200 - - - 基于金磁微粒的化学发光检测吗啡 化学发光检测吗啡原理示意图 随着吗啡浓度的增加，发光值降低，产生了明显的竞争效果，最低检出量可达30ng/ml。 免疫层析检测试剂 MICT? Handheld System - MagnaBioSciences Co. Magnetization of magnetic particles at test and control line on the NC membrane MAR Assay Development System -MagnaBioSciences Co. HIV-1 p24 抗原检测: S. Workman, et al. Rapid detection of HIV-1 p24 antigen using magnetic immuno-chromatography (MICT). Journal of Virological Methods, 160:14–21, 2009 MICT assay的检测测卡 胶体金免疫层析定性检测： 灵敏度较低：最低检出限在0.25ng/ml左右 不能在血清中检测出早期HIV抗体。 磁性号定量检测 (MICT): 灵敏度高：最低检出限达0.015–0.031ng/ml 可以在血清中检测出早期HIV抗体。 磁性微粒免疫层析的优势 positive negetive hCG检测试纸条（金磁微粒法） hCG检测试纸条（胶体金法） 基于金磁微粒的hCG检测层析试纸条 纳米金磁微粒用于吗啡的检测 20 50 30 0 The conc. of morphine in urine sample（ng/ml） 200 300 100 Control Line Test Line 磁性微粒法纯化核酸 Genomic DNA 28S rRNA 18s rRNA 28S rRNA 18s rRNA 固相可逆吸附( solid-phase reversible immobilization， 简称SPRI)，是指在一定高盐和聚乙二醇浓度下，DNA可非特异性地结合于磁性微粒表面，当DNA与磁粒结合后，DNA-磁粒复合物要通过数次清洗，最后用TE溶液把DNA从磁粒上洗脱下来。 Hawkins T. L., O’Connor-Morin T., Roy A., et al. DNA purification and isolation using a solid- phase. Nucleic Acids Reseach, 1994, 22(21): 4544-4544. DNA纯化 磁性微粒核酸纯化系统 洗脱 磁性分离， 弃上清 清洗 加入GoldMag?金磁微粒， 结合总核酸 组织/全血 裂解 磁性分离， 弃上清 磁性分离， 得核酸 全血基因组DNA分离试剂盒（磁性微粒法）已获得国家医疗器械注册证书，并得到广泛应用。 法医样本基因组DNA分离试剂盒 1.2 Lifegen: 3.4 Qiagen:Biosprint 15 5.6 Qiagen：DNeasy 7.8 Promega: MagneSil? 9.10 Promega: Wizard? M：lambda DNA( Hind III digest) 基因组DNA提取效果与同类产品的比较 全血核酸提取试剂盒（磁性微粒法） 应用：微量或中量样本DNA提取，可配合工作站使用。 适合样本：抗凝血液、血凝块、干血点、白膜层 特点：快速、无污染、操作简单、得到样品质量高 保存2年以上不同全血样品纯化后的琼脂糖凝胶电泳的结果： 纯化得到的DNA可用于PCR扩增，测序等下游