微囊藻毒素-LR对HepG2细胞肿瘤相关基因表达的影响The effect of microcystin -LR on the expression of tumor related genes in HepG2 cells.pdfVIP

oNTHE EFFECToFMICRoCYSTIN．LR EXPRESSIONS0FTUMoRASSoCI』钢fED INHEPG2CELLS GENES ADissertationSubmittedto theGraduateSchoolofHenanNormal university inPartialFulfillmentofthe Requirements forthe ofMasterofScience Degree By 三Z砌O Xiaoyu Supervisor：Prof．Li April，2016 万方数据 摘要 可诱发肝炎并促发肝癌，对易感人群健康存在极大威胁。本实验通过研究MCs对人肝 癌细胞HepG2肝癌相关的原癌基因及抑癌基因表达的影响，探讨该毒素诱导肝炎／肝癌 的机理，为毒素暴露人群健康的防护提供理论支撑。 本研究采用常规细胞毒性实验方法，用纯毒素MC．LR对HepG2细胞进行染毒处理， MTT法检测细胞活力，以确定该毒素的细胞毒性。根据细胞毒性及其细胞活力实验结 nM、10nM、50nM、0．5 果，我们选择MC．LR的非细胞毒染毒浓度为0 pM、10斗M、 hj24h、48h和72h。细胞染毒处理结束后，收集 50州、100gM；染毒时间分别为8 采用Westernblot方法检测上述基因蛋白水平的表达。本研究所获得的主要实验结果有 如下3个方面。 1．MTT检测结果和MC．LR的细胞毒性 h、24 h时，MTT检测发现，染毒组和对照组之间对． 用MC—LR处理HepG2细胞8 比发现细胞活力无统计学差异。处理48h时(除100gM组)染毒组细胞活性虽有所降 低，但与对照组相比仍无明显差别。仅100 MC—LR暴露48h后，细胞活力与对照 gM 组相比显著下降。 · 2．MC．LR对ttepG2细胞原癌基因及抑癌基因转录水平表达的影响 因c-Met的表达。 h时即明显上调，且均达到最高峰。染毒 原癌基因c-fos转录水平经MC．LR染毒8 24 h、48h和72 原癌基因c-fos的表达，而且染毒浓度越高，促进作用越明显。 h时，各浓度组和对照组相比均显 原癌基因c-jun的mRNA水平在MC．LR处理8 万方数据 著上升，并且随着染毒剂量的加大而升高。处理24h时持续上调但高浓度组相对于低浓 度组升高更为明显，且各染毒组均上调到最高峰。48h和72h各浓度组仍然上调，但上 表达。 MC—LR染毒8 h时，各浓度组细胞c-myc的转录水平均较对照组升高并达到最高峰。 24h、48h和72