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蛋白质、蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用蛋白质、蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用

2008年第1期 食品工程. 15 3月出版 FOODENGINEERING 蛋白质、 蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用 Studieson of separation,purificationprotein, and andtheir proteaseoligopeptideapplications 喇文军‘ (深圳职业技术学院应用生物技术系,深圳518055) LA Wen-jun‘ of 518055,China) (DepartmentAppliedBio-teehnology,ShenzhenPolytechnic,Shenzhen 摘要介绍了蛋白质、蛋白酶以及短肽类研究 1分离方法 的一些传统方法和新兴方法。主要对分离、提纯、 鉴定及分析方法的使用条件、适用范围、操作步 1.1反相高效液相色谱法 骤、各自特点和应用价值作了简要阐述,并对有 反相高效液相色谱法通常采用低离子强度酸性 关方法进行了比较与评价。 有机冲洗液和烷基硅胶键合固定相,影响分离的因 关键词蛋白质;蛋白酶;短肽;分离;提纯 素主要有流动相组成、洗脱湿度、洗脱液pH值、 Abstract the This showstraditionalandthenew paper 离子对试剂和流速等;有利于分离的条件是低pH methodsto 值、流动相、室温或较高的温度及使用乙腈或异丙 studyprotein,protease,oligopeptides.The conditionsof of 醇作为有机部分,三氟乙酸frrA)对于蛋白质及气相 use,scopeapphcafion,operatingsteps, characteristicsand valuesoftheir 色谱公认是一种较好的流动相添加剂。蛋白质的保 application separation, and were de- 留性质和选择性还与键合固定相的性质有关,采用 purification,identificationanalysisbriefly themethodswere andevaluated. scribed,and compared 大孔硅胶和短链烷基键合固定相在蛋白质分离中具 keywords 有优势。 protein;protease;oligopeptides;separa- tion;purification 1.2正交轴逆流色谱法 正交轴逆流色谱法是新近发展起来的一种方 蛋白质是生物体内的一类重要活性物质,对 法。具体是:以体积比(质量分数为12.5%的 生命过程起着重要的调节作用,是生命现象和分 子生物学研究最基本和最重要的对象之一。与之 相关的各种技术种类繁多,近年来又有很大发 30%磷酸氢二钾)=1:1为溶剂系统,以下相作流动 展,不少传统技术也以新的姿态出现。而酶类和 相,上相作固定相,操作

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