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蛋白质、蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用蛋白质、蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用
2008年第1期 食品工程. 15
3月出版 FOODENGINEERING
蛋白质、 蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用
Studieson of
separation,purificationprotein,
and andtheir
proteaseoligopeptideapplications
喇文军‘
(深圳职业技术学院应用生物技术系,深圳518055)
LA
Wen-jun‘
of 518055,China)
(DepartmentAppliedBio-teehnology,ShenzhenPolytechnic,Shenzhen
摘要介绍了蛋白质、蛋白酶以及短肽类研究 1分离方法
的一些传统方法和新兴方法。主要对分离、提纯、
鉴定及分析方法的使用条件、适用范围、操作步 1.1反相高效液相色谱法
骤、各自特点和应用价值作了简要阐述,并对有 反相高效液相色谱法通常采用低离子强度酸性
关方法进行了比较与评价。 有机冲洗液和烷基硅胶键合固定相,影响分离的因
关键词蛋白质;蛋白酶;短肽;分离;提纯 素主要有流动相组成、洗脱湿度、洗脱液pH值、
Abstract the
This showstraditionalandthenew
paper 离子对试剂和流速等;有利于分离的条件是低pH
methodsto 值、流动相、室温或较高的温度及使用乙腈或异丙
studyprotein,protease,oligopeptides.The
conditionsof of 醇作为有机部分,三氟乙酸frrA)对于蛋白质及气相
use,scopeapphcafion,operatingsteps,
characteristicsand valuesoftheir 色谱公认是一种较好的流动相添加剂。蛋白质的保
application separation,
and were de- 留性质和选择性还与键合固定相的性质有关,采用
purification,identificationanalysisbriefly
themethodswere andevaluated.
scribed,and compared 大孔硅胶和短链烷基键合固定相在蛋白质分离中具
keywords 有优势。
protein;protease;oligopeptides;separa-
tion;purification 1.2正交轴逆流色谱法
正交轴逆流色谱法是新近发展起来的一种方
蛋白质是生物体内的一类重要活性物质,对 法。具体是:以体积比(质量分数为12.5%的
生命过程起着重要的调节作用,是生命现象和分
子生物学研究最基本和最重要的对象之一。与之
相关的各种技术种类繁多,近年来又有很大发 30%磷酸氢二钾)=1:1为溶剂系统,以下相作流动
展,不少传统技术也以新的姿态出现。而酶类和 相,上相作固定相,操作
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