蛋白表达解决方案.pptx

;主要内容 1，成功案例分享 2，蛋白表达客户工作流程及存在的问题 3，AJ 解决方案 ;德国耶拿公司—Western Blot 整体解决方案;Western 流程;5;6;7;原因;UVP Chemstudio系列超敏化学发光成像;数据可追溯 ;如何选择合适的western blot检测方法？;斯隆-凯瑟琳癌症中心主任Ushma S. Neill在担任 “临床调查研究杂志”评审期间曾连续拒绝了四篇本已接受并准备发表的来稿后明确指出，所有提交的western数据的建立必须是平等的，其中包括： 所采用的检测方法定量范围是否可靠？ 实验者如何确定化学发光的曝光时间？ 是否有内参？内参是否可靠？ 分析结果是否使用的是原始数据 原始数据是否被人修改 ;电泳胶和印迹 “For quantitative comparisons, appropriate reagents, controls and imaging methods with linear signal ranges should be used.” “对于定量比较实验，应该使用适当的试剂、参比及线性范围内的成像方法。” --- Nature ;Western Blot Workflow-Detection;化学发光检测的优势;Chemiluminescence-Western Blot;Chemiluminescence-Western Blot;为什么 CCD技术优于底片成像？; 成像方式;CCD具有更宽的动力学线性范围(4.0 个数量级） 底片的动力学线性范围低（1.5 ~ 1.9 个数量级) CCD可进行更精确的浓度比较 CCD无需多次曝光 CCD系统 可提示过饱和反应 过饱和像素警示 底片无法警示过饱和区域------数据失真 CCD 系统无需任何消耗品 无需底片及冲洗试剂 无需冲洗设备及暗室 降低了输出成本 (热敏打印 vs. 底片) ;化学发光 vs. X光片曝光 ;CCD成像与胶片法对比;化学发光成像的局限;24;多色荧光—多重检测;凝胶制备;磷酸化蛋白检测;近红外成像更适合western blot成像;29;Western 检测的方法; 化学发光（灵敏度） + 最优搭配 近红外多色荧光 （宽线性范围，多重检测，持久信号）;UVP Chemstudio全能成像 ;在体实时检测的解决办法—活体成像;动物成像;氙灯光源： 可以为成像系统提供从紫外到近红外的全光谱激发光，即可作为顶置光源，亦可作为透射光源，无限扩展了仪器的荧光成像应用。 氙灯光源提供更强的激发光，提高检测灵敏度。 应用举例：RGB/NIR多色荧光???像、2D DIGE、小动物活体成像和植物成像。;荧光光源介绍;滤光片的选择;AJ如何帮助客户如何提高实验效率？;快速半干转印 快速：15min-50min，湿转一般1.5h-过夜 节省缓冲液、冷却循环水腔 ;高通量湿转模块;德国耶拿公司—Western Blot 整体解决方案;