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331 中国公共卫生管理2011 年6 月第27 卷第3 期(总第147 期) Chin. J of PHM. Jun. 2011 Vol. 27 No.3 · · 本菌株虽然有二种不同生物学性状，但经生化试验和血清 须在筛选生化符合的基础上，进一步做完整的生化反应。特别 学试验，证实是同一种菌。本菌株部分发酵乳糖，部分不发酵 对不典型的细菌，更要全面考虑。 乳糖。 SS 平板是强选择性平板，理论上大肠埃希氏菌应不生 长，即使生长，部分特性也会受到抑制。但一种菌在相同培养 参 考 文 献 条件下有二种不同性状的菌落，还有待进一步探讨。 临床上肠杆菌鉴定一般都做简单生化反应，如三糖铁试 [1] 何晓青 .卫生防疫细菌检验 [M].北京 : 新华出版社，1989.157 验，加血清玻片凝集，二者都符合即出具报告。所以误检漏检 [2] 潘跃顺，赵克义. 志贺氏菌实验室检测的漏检和误诊因素分析[J]. 的几率比较大。大肠埃希氏菌与志贺氏菌有鉴别意义的反应 中国公共卫生,,2001,17(6) :569- 570. 常做的有发酵乳糖、产气、动力试验，按定义前者三项试验均 [3] 爱德华 P.R, 爱文W.H, 著，郝士海，舒浚，米竹君，等译.肠杆菌科 为阳性，后者都为阴性。但有很多报道证明，部分大肠埃希氏 的鉴定[M]. 第 3 版.南昌:新华出版社. [3] 菌不发酵乳糖，部分志贺氏菌可产气 。还有的鉴别试验如噬 收稿日期：2010- 10- 29 （杨征武编校） 菌体裂解试验等基层临床基本不做，所以要减少误检漏检，必 一步RT- PCR 方法在黑龙江省手足口病病原检测中的应用 王开利，陈淑红，陈露菲，郭京晓，魏忠君，曹霞，张静，刘芳，李冀宏 摘要：目的 了解核酸检测方法在黑龙江省手足口病病原谱调查中的应用价值，为疾病防控提供依据。方法 在全省范围内收集 2009 年 和 2010 年疑似手足口病病人疱疹液、咽拭子或肛拭子标本，使用人肠道病毒通用引物、肠道病毒 71 型（EV71）引物和萨奇病毒A 组 16 型 （CVA16）引物，采用一步RT- PCR 方法进行病原核酸检测，进而分析病原构成，并对部分核酸检测阳性标本进行病毒分离。 结果 2009 年 检测标本 985 份，其中 EV71 阳性226 份、CVA16 阳性 191 份、EV71 和 CVA16 合并阳性 3 份，其他肠道病毒阳性 100 份。2010 年检测标本 1696 份，其中 EV71 阳性354 份、CVA16 阳性356 份、其他肠道病毒阳性 188 份。两年标本肠道病毒阳性率平均为 52.87 ％ ，其中EV71 和 CVA16 占阳性标本中病原总数的79.69 ％。选取 353 份核酸检测阳性标本进行病毒分离，共获得毒株 265 株。结论 一步RT- PCR 方法用于 手足口病病原检测稳定、特异、快捷、易于分型，EV71 和 CVA16 是黑龙江省近两年手足口病的主要病原体。 关键词：手足口病；肠道病毒；一步RT- PCR ；检测 中图分类号：R372 文献标识码：A 文章