特异性亲和吸附法纯化冬小麦麸皮抗冻蛋白 Purification of Wheat (Triticum aestivum L.)Bran Antifreeze Protein by Specific Affinity Absorption.pdfVIP

2009年8月 中国粮油学报 v01．24．No．8 第24卷第8期 oftheChineseCerealsandOilsAssociation Journal Aug．2009 特异性亲和吸附法纯化冬小麦麸皮抗冻蛋白 张 超1’2 赵晓燕1 马 越1 张 晖2 李冀新3 姚惠源2 (国家蔬菜工程技术研究中心北京市农林科学院1，北京100097) (江南大学食品科学与工程国家重点实验室2，无锡214122) (新疆农垦科学院特产研究所3，石河子832000) 摘要抗冻蛋白是一种可以非依数性降低体系冰点的蛋白质，在生命体内具有非常重要的生理作用， 广泛地应用于食品、医学和生物技术等领域。首先通过热重分析仪法和分配系数法研究证明冬小麦麸皮抗冻 蛋白(死AFP)具有较强的亲水性和亲冰性，进一步使用特异性亲和吸附法对其纯化，产率1．64％，获得电泳纯 TaAFP。纯化过程中充分利用其自身较强的亲水和亲冰的特性。该方法具有步骤少、耗时较短等优点，比传 统的色谱方法更加快捷高效，但是对纯化过程的控制要求严格。 关键词冬小麦麸皮抗冻蛋白 特异性亲和 中图分类号：TS201．9文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2009)08—0012—05 抗冻蛋白(Antifreeze protein，AFP)是一种可以非 1 材料与方法 依数性降低体系冰点，抑制体系发生重结晶现象的 1．1试验材料与设备 ～种蛋白质。利用AFP上述特性提高食品品质的研 红萝b在当地超市购买；冬小麦麸皮由山西省 农科院提供(晋麦81号，2004年种植)；低分子质量 究受到相关研究者的关注。Mizuno等…1就在冷冻食 品加工中添加AFP以降低重结晶现象，提高产品品 标准蛋白Marker，上海华美生物技术有限公司；牛血 8erUlll 清白蛋白(Bovine 质；Grandum等【2J发现AFP可以提高冰淇淋的产品质 一250、十二烷基硫酸钠和N，N，N，’N’一四甲基乙二 量；Payne等【3J研究发现AFP可以有效地降低储藏对 胺：Sigma公司；三羟甲基氨基甲烷、丙烯酰胺和甲叉 肉制品的损伤；本课题组将红萝卜AFP应用在冷冻双丙烯酰胺：中国医药集团上海化学试剂公司。 面团中，提高面团的发酵能力，提高面包的质量，并 TGA／SDTA 851e热重分析仪(7眦)：瑞士梅特勒 引入一种宜人的香气(反式石竹烯)[4-s】。可以说， AFP在食品中应用前途光明。 美国PE公司；MPIU电泳槽：美国伯乐公司；Protein 因此，发现并获得新的、价格低廉的AFP资源将 KW一803色谱凝胶柱：日本Shodex公司。 1．2红萝bAFP的纯化 有助于该领域的进步。本课题组从晋麦81号麸皮中 红萝b(Daucus 获得一种新的冬小麦麸皮抗冻蛋白(TaAFP)C6]，初步 等【9J9纯化方法。 解决了资源问题。但是，一系列色谱手段在工业中