枳壳多糖CALB-1的提取分离纯化及免疫调节-天津中草药杂志社.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 5 期 2015 年 3 月 ·639 · 枳壳多糖 CALB-1 的提取、分离纯化及免疫调节活性研究 1 1 2 3 1 1* 邢 娜 ，舒尊鹏 ，徐炳清 ，焦文娟 ，王秋红 ，匡海学 1. 黑龙江中医药大学 教育部北药基础与应用研究重点实验室，黑龙江中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室，黑 龙江 哈尔滨 150040 2. 齐齐哈尔市中医医院，黑龙江 齐齐哈尔 161000 3. 江苏康缘药业股份有限公司，江苏 连云港 222000 摘 要：目的 从枳壳粗多糖中分离纯化得到精制枳壳多糖（CALB-1 ），并对其结构和免疫调节活性进行研究。方法 采用 热水提取法提取获得枳壳粗多糖（CALB ），通过阴阳离子交换树脂、离子交换琼脂糖凝胶等方法对 CALB 进行分离纯化， 得到 CALB-1 。采用高效液相色谱法（HPLC ）测定CALB-1 的相对分子质量。综合运用红外（IR ）光谱、高碘酸氧化、Smith 氧化降解、甲基化、扫描式电子显微镜（SEM）和原子力显微镜（AFM ）等方法考察 CALB-1 的结构及分子形态。采用体 外脾细胞增殖实验及在体对小鼠单核细胞吞噬作用的影响实验测定 CALB-1 的免疫调节活性。结果 经 HPLC 测定 CALB-1 7 为均一多糖，其相对分子质量为 3.28 ×10 。综合化学手段和IR 光谱分析得到 CALB-1 为多支结构的酸性多糖，其主链主要 由阿拉伯糖（Ara ）、甘露糖（Man ）和半乳糖（Gal ）构成，且主要以 1→、1→4 键型存在。分子形态考察结果显示 CALB-1 为非晶态固体。CALB-1 具有促进小鼠脾细胞增殖的作用，并可提高免疫低下模型小鼠的廓清指数（K ）值和吞噬指数（α）。 结论 CALB-1 为多支结构的均一相对分子质量的酸性多糖，且具有较好的免疫调节作用，为枳壳多糖进一步的深入研究奠 定了理论基础。 关键词：枳壳；多糖；分离纯化；结构鉴定；免疫调节活性 中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)05 - 0639 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.05.005 Isolation, purification, and structural elucidation of polysaccharide CALB-1 from Aurantii Fructus and study on its immunoregulatory activity 1 1 2 3 1 1 XING Na , SHU Zun-peng , XU Bing-qing , JIAO Wen-juan , WANG Qiu-hong , KUANG Hai-xue 1. Key Laboratory of Chinese Materia Medica, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Ministry of Education, Key Laboratory of TCM Pharmacodynamic Material Base, Harbin 150040, China 2. Qiqihaer City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Qiqihaer 161000, China 3. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang 222000, China Abstract: Objective To separate and purify the crude polysaccharide from Aurantii Fruc