二氧化硅基纳米载体固定木瓜蛋白酶研讨.pdfVIP

onImmobilization of on Study SilicaBased Papain Nano．．Carriers A DissertationSubmittedto of NanjingUniversity Technology in fulfillmentof partial requirement for the of degree Masterof Engineering By - JingZong Shen Supervisors：Prof．Shubao 2007 May 固定化方法可以提高酶的热稳定性，使酶能够方便地从反应体系中分离并且反复 利用。但是传统的固定化方法有许多缺点，如固定化酶的酶活降低，固定成本较高。 因此，至今只有少数固定化酶在工业中得到应用。 相对于较大尺度物质而言，纳米材料具有小尺寸效应、表面效应、量子尺寸效应、 宏观量子隧道效应等优异性能。纳米材料在酶固定化方面的应用受到了国内外学者越 来越多的关注。许多研究表明固定化酶与纳米材料载体结合后其稳定性和催化活性大 大增强。 木瓜蛋白酶是一种巯基蛋白酶，具有很大的商业价值和医药应用潜力，并且木瓜 蛋白酶在结构和酶动力学上都已得到了深入的研究，适合作为评价固定方法的模式 酶。 通过碱性条件下正硅酸乙酯的水解制备了二氧化硅纳米颗粒；通过正硅酸乙酯和 丫．氨丙基7_,氧基硅烷同步水解，一步法制备了氨基化二氧化硅纳米颗粒；通过氧化 还原反应在氨基化二氧化硅纳米颗粒上沉积银纳米粒子，制备了银／-氧化硅复合纳 米颗粒。 当二氧化硅纳米颗粒吸附固定木瓜蛋白酶时，最佳吸附时间为4h，最适给酶量 为15 mg儋载体；氨基化二氧化硅纳米颗粒和银／-氧化硅复合纳米颗粒共价固定木瓜 蛋白酶时，最适给酶量为10 mg／g载体。载体中掺入银纳米粒子能够大幅提高酶负载 率和固定化酶相对活力，当载体的银负载量为0．68％时，固定化酶的酶活回收率最高， 比使用未负载银的载体时提高了188％。 银／--氧化硅复合纳米颗粒共价固定的木瓜蛋白酶热稳定性比游离酶好很多，重 复使用20次后仍保持原固定化酶活力的43％，4℃下储存2个月后酶活只下降4％。 关键词： 木瓜蛋白酶固定化二氧化硅银纳米颗粒 the tobe fromreaction enzymeseparated system andused easily traditional methodsofimmobilization have as