人参皂苷Rg3吸收机制及药动学研讨.pdfVIP

中 国万右利 气 卜节阵创卜今仑另七 中文摘要 1分析方法的建立与验证 高灵敏度和高选择性的分析方法是体内微量药物测定的技术保障。建立灵 敏、可靠、稳定的同时检测人参皂昔Rg3，次皂昔Rh2及昔元ppd的分析方法是 本论文研究的基础。选用了电喷雾离子源、液质联用检测方法 ((ESI-LC-MS), 优化并确定了液相色谱条件、质谱检测方式及参数。生物样品的预处理采用固相 萃取法。流动相为:流动相由乙睛-500NM氯化钱水溶液(v/v)，采用梯度洗脱方 式，IS,Rg3,Rh2及ppd的荷质比m/z分别是799.55,819.50,657.35及495.40, 均为加氯峰M【十C1I。通过方法学的考证，其线性、回收率、日间及日内变异均 符合生物样品的分析要求。 2整体动物的药代动力学研究 Beagle犬分别经静脉注射及灌胃给予Rg3及其主要活性代谢物之一Rh2, LC/MS方法检测血浆中药物浓度，Rg3在犬体内的药代动力学行为可以有开 放性二室模型来描述，TI/2a及T,rzg分别为0.9010.19h及6.4711.76h。表观分 布容积V为0.35士1.76L.kgi，中央室分布容积V1为0.07L.kgI，血浆清除率CL 为0.04(L.h-.kg),Rg3犬灌胃后有一部分脱去葡萄糖基转换成代谢物Rh2和 ppd，经计算Rg3原药在犬体内的绝对生物利用度为1.69%;人参皂昔Rh2的 吸收程度和消除速率均快于原药Rg3，计算得出犬灌服Rg3后原药转化成Rh2 的程度小于10%,igRg3时血中Rh2的AUC只占直接igRh2的6.35%(123.67/ 1946.52)，但是Rh2是一个中间代谢物，它边吸收边转变成昔元，是一个动态 的变化过程。犬静脉注射Rg3后，于给药15分钟后即可在血浆中检测出Rh2, 但各时间点测得浓度均较低(小于lOng.mLi)且不规则。因而Rg3的首过效应 主要是发生在肠道的。Rh2在犬体内的绝对生物利用度为21.98%e 3在体小肠吸收模型研究Rg3的吸收及影响因素 运用在体小肠回流实验来研究人参皂昔Rg3的吸收情况和胆管引流对其吸 收的影响，通过小肠回流中药物减少量来计算吸收动力学参数，ESI-HPLC-MS方 中. 茜科 大*p挤d-iPA 法用于样品分析研究大鼠小肠对人参皂普Rg3的在体吸收及其动力学过程，考察 胆汁排泄对其吸收的影响 。大鼠在体小肠吸收实验明胆汁引流对Rg3的吸收速 率无明显影响。 4Cac。一细胞对人参皂昔Rg3摄取、转运及代谢研究 研究Caco-2细胞对人参皂昔Rg3的摄取、代谢及其动力学变化。采用液相 色谱质谱联用 (HPLC-MS)检测方法测定细胞中Rg3及其代谢产物Rh2药物浓 度，考察时间、pH值、温度、药物浓度及抑制剂对Rg3摄取速率及代谢物产量的 影响。Rg3在Caco-2细胞上的摄取是时间及浓度依赖性的。加入代谢抑制剂叠 氮化钠及2,4一二硝基酚时摄取速率明显降低，Rg3在肠道中的代谢为其生物利用 度低的原因之一。 5，运用体外肠、肝微粒体模型研究人参皂普Rg3的代谢 运用体外肠、肝微粒体模型对人参皂昔Rg3的代谢研究表明，Rh2是其主 要的代谢产物，CYP4503A的特异性抑制剂酮康陛能抑制其代谢速率。研究表 明，Rg3经胃酸降解及肝、肠首过是其生物利用度低的原因之一。 .‘运用流式细胞仪研究Rg3,Rh2及ppd对p糖蛋白底物罗丹明123(Rh123) 在K562IA02细胞中积累的影响。 结果表明，Rg3和Rh2均能明显增加Rh123的累积。 7.小结 在建立了灵敏可靠的分析方法基础上，通过体外、在体、离体、细胞及分子 生物学水平多方面、多层次的实验结果表明:人参皂昔Rg3吸收差和低生物利 用度的原因可能归结于:1)药物的溶解性差;2)胃内酸度对纯3的轻度降解; 3)肝、肠微粒体的I相代谢作用;4)P-gp的外排作用等等。Rg3可在胃肠 中不断被降解或代谢成其脱糖基代谢物Rh2及昔元ppd，从而不断被机体吸收 而协同发挥抗肿瘤药效，与此同时各种成分在胃肠中又不断受到P-gp转运体的 外排作用，使得生物利用度进一步下降。Rg3药物分子在肠腔中可以重复摄入、 代谢，外排这几个过程而形成循环，进一步降低了药物的吸收及其生物利用度。 中 困 16月略大 理卜节阵侧七今仑文