4 种方法制备冷沉淀的质量分析.docVIP

精品论文 参考文献 4 种方法制备冷沉淀的质量分析 苏红 曾四海 李志 黄可君（ 广州血液中心 广东广州 5 1 0 0 9 5 ） 　　【摘要】目的 通过分析离心法和虹吸法制备冷沉淀（同批次制备）的质量，选择更加优化的冷沉淀制备方法。方法 取同一制备日期的冷沉淀原料血浆，分别采用冷藏融化离心法、水浴融化离心法（两种温度条件）、水浴融化虹吸法制备冷沉淀，分别按照机械抽样法抽样样品，检测冷沉淀中F Ⅷ含量并进行统计分析。结果 4℃冷藏融化离心法的F Ⅷ含量为65.17plusmn;27.39（IU ／袋），合格率为40%（8 ／ 20）；4℃水浴融化离心法的F Ⅷ含量为89.67plusmn;39.96（IU ／袋），合格率为60％（12 ／ 20）；2℃水浴融化离心法的F Ⅷ含量为84.33plusmn;30.57（I U ／袋），合格率为：55％（11 ／ 20）；4℃水浴融化虹吸法F Ⅷ含量为108.85plusmn;42.41（IU ／袋），合格率为83.3％（25 ／ 30）。经单因素方差分析，4℃水浴融化虹吸法的质量水平明显优于其他三种方法。结论 水浴融化虹吸法制备冷沉淀操作简便、快捷，F Ⅷ合格率高，明显优于冷藏融化离心法和水浴融化离心法，值得推广应用。 　　【关键词】 冷沉淀 凝血因子Ⅷ【中图分类号】R197.38 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）36-0061-02冷沉淀是采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆（f r e s hfrozen plasma，FFP）在1℃～ 6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物质在1 小时内速冻成固态的成分血[1]。根据冷沉淀在低温条件下不融化的特性，可制定不同的制备方法，目前血站常用的制备方法主要有：离心法，原料血浆放置于4plusmn;2℃冰箱或在4plusmn;2℃恒温水浴箱中融化，待基本融化后，在4plusmn;2℃重离心，分离出上层血浆，剩下少量血浆和沉淀物，制成冷沉淀；虹吸法，在4plusmn;2℃恒温循环解冻箱中放入原料血浆，转移空袋置于箱体外低位，松开止血夹，启动循环水流和震荡摇摆，血浆融化过程中，随时被虹吸至转移空袋中，当融化至剩下约少量血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸，定量，制成冷沉淀[2]。 　　本文旨在利用同一批原料血浆使用不同的制备方法制备冷沉淀，通过分析凝血因子Ⅷ的质量水平，选择更高效的冷沉淀制备方法。 　　1.材料与方法1.1 冷沉淀原料血浆本中心体检采血科采集的400ml 四联袋全血，要求在采血后6 小时之内制备并冻结成固态且各项检测合格的新鲜冰冻血浆。 　　1.2 仪器设备美国SORVAL L RC-12BP 大容量冷冻离心机， 费森尤斯Compomat G4 血液分离机，低温操作台，-20℃低温冰箱，4℃贮血冰箱，恒温循环解冻箱，MBF21 平板速冻机1.3 制备冷沉淀的方法1.3.1 冷藏融化离心法（A 组） 将40 份原料血浆置于4℃贮血冰箱中过夜（10- l2h），待其融化到剩下少量冰碴时取出，在已预温的离心机中离心（4℃、4000g、8mi n），分离出上层血浆，下层剩下约30ml 带小量冰碴或絮状物的糊状液体，定量，热合封口后将冷沉淀迅速置于平板速冻机内冻结成固态。 　　1.3.2 水浴融化离心法（B 组、C 组） 将血浆轻放入已预热的恒温循环解冻箱中（温度分别设定为2℃及4℃），血浆按照错位排列的方式放入，每个恒温循环解冻箱中放入30 袋，启动循环水流和震荡摇摆，盖上箱盖。待其融化到剩下少量冰碴时取出并尽快装杯并配平，在已预降温的离心机中离心（4℃、4000g、8m in），分离出上层血浆，下层剩下约30ml 带小量冰碴或絮状物的糊状液体，定量，热合封口后将冷沉淀迅速置于平板速冻机内冻结成固态。血浆融化需时100-110m i n（2℃水温）或75-80 min（4℃水温）。 　　1.3.3 水浴融化虹吸法（D 组、D1 组、D2 组） 将血浆轻放入已预热的恒温循环解冻箱中（温度设定为4℃），血浆按照错位排列的方式放入，每个恒温循环解冻箱中放入30 袋，转移空袋置于箱体外低位，松开止血夹，启动循环水流和震荡摇摆，盖上箱盖。血浆融化过程中，随时被虹吸至转移空袋中。当融化至剩下约30 ml 血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸，定量，热合封口后将冷沉淀迅速置于平板速冻机内冻结成固态。血浆融化需时50-60min。 　　1.3.4 质量标准 由200ml FFP 制备的冷沉淀：F Ⅷ含量ge; 80IU/袋 [1]。 　　1.4 抽样采用机械抽样法，在成品中取得A 组、B 组、C 组（各20 份）和D 组、D1 组、D2 组（各10 份）样品。 　　1.5 凝血因子Ⅷ检测采用BECKMAN