miR-124在甲状腺癌中的表达以及在肿瘤细胞增殖和侵袭转移作用的研究.docVIP

精品论文 参考文献 miR-124在甲状腺癌中的表达以及在肿瘤细胞增殖和侵袭转移作用的研究 刘秀军1 郭秀春2（通讯作者） 秦娜3 　　（1内蒙古巴彦淖尔市医院甲乳外科 内蒙古巴彦淖尔 015000） 　　（2内蒙古巴彦淖尔市医院肿瘤内科 内蒙古巴彦淖尔 015000） 　　（3内蒙古巴彦淖尔市医院神经内科 内蒙古巴彦淖尔 015000） 　　【摘要】目的：为检测miR-124在甲状腺乳头癌组织中的表达情况，探讨miR-124在甲状腺乳头状癌发生发展、侵袭转移中的相关功能机制。方法：收集2014年3月～2015年4月在我院手术切除并经病理确诊的50例无淋巴结转移甲状腺乳头状癌患者新鲜组织，30例甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移患者的原发灶组织、其对应的30例转移淋巴结癌组织，以及50例甲状腺腺瘤肿块旁组织作为对照。采用实时荧光定量real-time PCR方法检测miR-124，ELISA法检测检测IQGAPl在无转移甲状腺组织、有转移甲状腺癌原发灶、转移灶组织、腺瘤肿块旁组织中的表达情况。结果：real-time PCR检测在腺瘤肿块旁组织、无转移甲状腺乳头状癌、有淋巴结转移甲状腺乳头状癌原发灶、转移甲状腺乳头状癌淋巴结转移灶中miR-124的相对表达量依次降低(Plt;O.01)。ELISA法检测IQGAPl结果显示无转移PTC癌组织、有转移PTC原发灶、PTC转移灶腺瘤肿块旁组织中IQGAPl表达依次增加。结论：miR-124在甲状腺乳头状癌组织及细胞中低表达尤其是淋巴结转移灶中更为明显，提示miR-124与甲状腺乳头状癌侵袭转移相关。 　　【关键词】甲状腺癌；miR-124 ；侵袭转移 　　【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）09-0035-02 　　甲状腺癌是最常见的内分泌器官来源恶性肿瘤，占所有内分泌肿瘤的94.5％和所有恶性肿瘤的2.6％，发病率在头颈部恶性肿瘤中居首位。MicroRNA(miRNA)是近些年来被发现的一类非编码单链小RNA分子。已知MicroRNA在多种恶性肿瘤中表达异常。本研究的目的为检测miR-124在甲状腺乳头癌组织中的表达情况。 　　1.材料和方法 　　1.1 一般材料 　　收集2014年3月～2015年4月在我院手术切除并经病理确诊的50例无淋巴结转移甲状腺乳头状癌患者新鲜组织，30例甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移患者的原发灶组织、其对应的30例转移淋巴结癌组织，以及30例甲状腺腺瘤肿块旁组织作为对照。 　　1.2 方法 　　采用实时荧光定量real-time PCR方法检测miR-124在无转移甲状腺组织、有转移甲状腺癌原发灶、转移灶组织、腺瘤肿块旁组织中的表达情况。ELISA法检测IQGAPl在无转移甲状腺组织、有转移甲状腺癌原发灶、转移灶组织、腺瘤肿块旁组织中的表达情况在无转移甲状腺组织、有转移甲状腺癌原发灶、转移灶组织、腺瘤肿块旁组织中的表达情况。 　　1.3 统计学处理 　　计量资料以均数plusmn;标准差(x-plusmn;s)表示，组间数据采用t检验，以Plt;0.05 为差异有显著性。 　　2.结果 　　Real-time PCR检测甲状腺乳头状癌中miR-124的表达水平目的基因miR-124的扩增曲线符合4个特征性阶段(基线期，指数期初起，指数期，平台期)的平滑曲线，熔解曲线只有一个峰值，没有出现杂峰(见图la、图1)。提示目的基因得到有效扩增、基因扩增产物单一，符合实验要求。计算各标本组中miR-124的相对表达量。我们发现无转移PTC癌组织、有转移PTC原发灶、PTC转移灶中miR-124的相对表达量分别只为腺瘤肿块旁组织中miR-124表达量的0.56倍、0.42倍、0.33倍。其中无转移PTC癌组织的相对量表达量为1.89plusmn;0.162，有转移的PTC原发灶为1.43plusmn;0.122，PT1AC转移灶为1.12plusmn;0.104，腺瘤肿块旁组织为3.33plusmn;0.165。LSD-t检验行两两比较，各组之间均有统计学意义差异(Plt;0.01，见表1)。 　　表1 Real-time PCR检测各组中miR-124的表达水平 　　提取无转移PTC癌组织、有转移PTC原发灶、PTC转移灶、腺瘤肿块旁组织的总蛋白，以GAPDH作为内参对照，应用Western blot的方法检测总蛋白中IQGAPl的表达。结果为我们发现无转移PTC癌组织、有转移PTC原发灶、PTC转移灶、腺瘤肿块旁组织中IQGAPl表达依次增加。其中无转移PTC癌组织的21.89plusmn;5.16，有转移的PT