乙醛刺激对大鼠肝星状细胞wnt信号通路的影响及其意义.docVIP

精品论文 参考文献 乙醛刺激对大鼠肝星状细胞wnt信号通路的影响及其意义 杨斌 　　邛崃医疗中心医院内三科，四川成都 611530 　　摘要：目的　通过观察乙醛刺激的肝星状细胞生长速度的变化以及细胞中Wnt信号通路中主要下游分子及目的基因mRNA表达的改变，探讨乙醛刺激对肝星状细胞活化的作用机制。方法　用乙醛刺激大鼠肝星状细胞，与同时正常培养的大鼠肝星状细胞为对照[1]。由MTT法绘制细胞生长曲线并对比。同时采用RT-PCR从mRNA水平观察Wnt信号通路相关指标的变化。结果 从细胞生长曲线的对比可以清晰发现：大鼠肝星状细胞在乙醛刺激后的生长和增殖速度明显高于正常细胞组。在乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中，Wnt信号通路中beta;- catenin（beta;一链蛋白）的mRNA表达增强[2]。结论　乙醛通过对大鼠肝星状细胞中Wnt信号通路的活化刺激大鼠肝星状细胞的增殖。 　　关键词　乙醛；肝星状细胞；Wnt信号通路。 　　Abstract：　Objective We explored the influence of acetaldehyde to rat hepatic stellate cells by observe the proliferation in rat hepatic stellate cells and the diversity of downstream moleculesrsquo; mRNA expression in wnt signaling pathway. 　　Methods we pretreat the rat hepatic stellate cell with acetaldehyde，using normal rat hepatic stellate cell as control. Drawn the cell growth curve using the method MTT，meanwhile RT-PCR methods were used in the study of downstream moleculesrsquo; mRNA expression in wnt signaling pathway. 　　Results From the contrast of the cell growth curve，we found clearly that growth and proliferation rate of rat hepatic stellate cells stimulated by acetaldehyde is faster than normal rat hepatic stellate cell as control..We also found that beta;-catenin（beta;-catenin）gene expression are enhanced in rat hepatic stellate cell stimulated by acetaldehyde. Conclusion The acetaldehyde can enhance the rat hepatic stellate cellrsquo;s proliferation through stimulating the wnt signaling pathway in cell. 　　Key Words：hepatic stellate cells；Wnt Signaling pathway；salidroside 　　肝星状细胞的活化是肝纤维化的核心环节，是临床肝纤维化的基础。长期大量饮酒是肝纤维化甚至肝硬化的重要病因，探讨乙醇的体内主要分解产物乙醛对肝细胞的刺激作用对临床上找到治疗酒精性肝纤维化的有效方法有重要意义。近年研究发现Wnt信号通路与肝星状细胞（HSC）活化及肝纤维化发生相关[3]。当Wnt经典通路活化时，Wnt与受体蛋白Frizzled结合并使未磷酸化的beta;-catenin在胞质中积累并转运到核中，从而激活转录因子，进一步激活细胞周期蛋白Cyclin-D基因等开始进行转录，刺激细胞增殖、永生化，去分化和转化等[4，5]。本实验运用RT-PCR的方法，在RNA水平上，对经乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中经典Wnt信号通路的代表分子beta;-catenin进行检测和比对。进一步探讨乙醛对大鼠肝星状细胞活化的影响。 　　1、材料和方法 　　1．1实验材料 　　大鼠HSC-T6细胞株，DMEM F-12 1：1培养基、小牛血清购自HyClone（Thermo），40%乙醛购自成都市科龙化工试剂厂，RT-PCR试剂盒购至Takara公司，be