2011CB707400-木质纤维素资源高效生物降解转化中的关键科学问题研究.doc

项目名称： 木质纤维素资源高效生物降解转化中的关键科学问题研究 曲音波 山东大学 2011.1至2015.8 教育部 山东省科技厅  总体目标： 生物炼制最终为在我国建立大规模利用木质纤维素资源转化液体燃料和大宗化学品的新型工业体系，实现社会可持续发展提供理论与技术基础。 五年预期： 1）通过阐述植物生物质抗生物降解的组成和结构特征，建立改造纤维生物质组成和结构以提高降解效率的理论体系；解析预处理技术对提高纤维生物质降解性的结构基础，高效、经济和实用的预处理技术； 2）研究微生物对天然或预处理后底物的降解机理，特别是纤维素解聚机理去结晶化途径，探讨采用现代系统生物技术，从复杂纤维质降解多酶体系中，筛选和发现新的高效、耐逆、适合工业要求的纤维质降解酶类；为降解不同的木质纤维素资源研制出低成本且高效的复合酶系； 3）选育适于转化纤维质为平台化合物的微生物，研究其代谢调控，构建代谢工程菌，研究定向转化平台化合物的过程及相关产品的利用途径；进而通过对产酶、酶解和发酵的反应动力学研究，将预处理技术、生物反应与分离过程耦合，提出新的生物炼制技术方案。 三、研究方案 1）学术思路： 以研究植物木质纤维素类生物质对生物降解的抗性屏障及其破解之道为核心，深入研究微生物多种多样的策略，探索人类干预生物降解过程，提高其降解转化效率，使之转而为人类服务的可能途径。 可以用下图简示： 2）技术途径： 以植物有效防止微生物及酶降解屏障为切入点，从宏观（细胞）微观（大分子）层次分析纳米生物催化剂在降解过程效率低下的原因出发，预处理，有利于纳米酶分子的作用（扩散持续性降解与），对微生物酶进行定向进化或理性改造，进而将一系列的集成，建立生物转化系统。 3) 创新点与特色： （1）提出木质纤维素的抗降解性是生物质难以高效转化的核心问题，从纳米尺度和生物降解角度来研究木质纤维素超分子结构；（2）深入研究生物质的微生物降解的多样性，寻找新的生物降解因子，设计出高效的复合生物催化剂；（3）使用分子生物学改造相关的产酶和发酵微生物，设计和构建工程微生物，实现全糖定向生物转化为生物基产品，并使应用生物转化过程的成本及投资明显降低；（4）完成木质纤维素类生物质转化的优化集成 课题1、植物生物质抗生物降解屏障解析与破解途径探索 研究内容： 1. 植物降解屏障定量 高通量、快速纤维生物质结构和组成分析。利用近红外（NIR）结合GC-MS细胞壁组份分析等技术建立高通量分析、快速测定生物质结构和化学组成的技术，为明确生物质结构和组成与纤维生物质降解转化之间的关系以及鉴定经分子改良的优良品系提供便捷的分析手段。2. 植物细胞壁生物质特性与降解转化效率的关系建立表征细胞壁超分子组成与结构的方法，测定木质纤维素生物质转化过程基本的物理化学限制因子；利用木素酶、半纤维素酶、纤维素酶等处理，研究细胞壁超分子结构中不同组分的构效关系；基于木质纤维素超分子结构研究纤维素酶催化过程的定量构效关系，与酶分子催化动力学过程，基于定向进化、定点突变等新技术提高酶组分的活力。 3．预处理过程中降解屏障的解构过程及其优化 预处理技术对降解屏障影响高效打开酶分子通道的可行方案考察不同预处理条件下的底物成分变化（如纤维素、半纤维素、木素含量变化）和结构变化（纤维素结晶度、聚合度变化）探讨发酵抑制物生成动力学15% 承担单位：中国科学院过程工程研究所、山东大学 课题负责人：陈洪章 学术骨干：赵建、王禄山、邱卫华 课题2、木质纤维素生物降解多样性、新降解因子及相关机理 研究内容： 1. 结晶纤维素结构解聚的分子机理及生物因子的分离鉴定特征化在生化分离分析的基础上，通过对特定菌种或群落的不同酶活组分及非酶组分的组合配比，借助蛋白质组学定性和定量分析鉴定技术，分离鉴定能提高木质纤维素协同酶解活性的关键组分；结合底物超微结构观察及酶分子吸附模拟，深入研究阐述在木质纤维素高效酶解过程中的作用机制。 用比较基因组学模式特定环境高效酶解体系结构组成，从寻找能促进提高现有酶系催化水解效率的或非因子深入研究阐述这些新在特殊环境中木质纤维素高效酶解过程中作用机制从中筛选和发现新的高效、耐逆、适合工业要求的促纤维质降解因子。15% 承担单位：中国科学院微生物研究所、山东大学 课题负责人：董志扬 学术骨干：陈冠军、刘巍峰、卢雪梅、倪金凤 课题3、真菌游离酶系纤维素降解机理、酶系合成调控与高效酶系重构 研究内容： 1. 真菌纤维素酶合成代谢调控分子机制研究 数字化全基因组表达谱分析荧光差异蛋白表达分析RNA沉默、酵母双杂交比较基因组学、转录组学鉴定关键节点基因/蛋白及其在纤维素酶表达调控网络中功能解析哪些基因或通路的改变导致了表型的变化，纤维素酶合成的真菌纤维素酶构建纤维酶半纤维酶以及纤维素的数据库，为降解