应用干细胞及生物支架技术治疗糖尿病初探研究.pdfVIP

学校代码：10023 学号：200401020 应用干细胞及生物支架技术治疗糖尿病初探 专业年级： 北京协和医学院临床医学专业2004级 姓 名： 蒙轩 导 师： 赵玉沛教授 北京协和医学院临床学院 副导师： 宋一民副教授 北京协和医学院临床学院 完成日期：2012年06月 目录 目录…．．．．．…．．…．．．．．．．．．．……．．．．．．．．……．…．．．．．2 缩略词表…．……．…．．．．．…．………………．……．．．4 摘要．．．．……．．．．．…．．．．．．．．．…．…．．．．．．．．．．．．…．…．．5 关键词……………………………………………………………………………………………5 r‘act．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6 Abst Words．．……………………．……………．．．…．．．．……．…．……．……．．．．．．．．．．………………．．．．．．．．．．．．．．……………．6 Key 第一部分通过制备畸胎瘤验证诱导多能干细胞(iPSO)的多能性．．7 1． 前言………………………………………………………………………………………7 2． 实验材料…………………………………………………………………………………8 3． 实验步骤…………………………………………………………………………………8 4． 检测方法…………………………………………………………………………………8 5． 实验结果…………………………………………………………………………………9 6． 讨论…………………………………………………………………………………………………………………．10 7． 结论…………………………………………………………………………………………………………………．11 第二部分 在二维及三维环境中诱导多能干细胞(iPSO)向胰岛样细胞 团分化方案初探．．．．…．．．．．．．…．．．……．．．．．．．．．．．．．．．．．．12 1． 前言…………………………………………………………………………………………………………………．12 2． 实验材料………………………………………………………………………………一17 2．1 研究材料及相关试剂………………………………………………………………17 2．2 主要仪器设备………………………………………………………………………19 3． 实验方法及步骤…………………………………………………………………………19 3．1 实验对象及分组……………………………………………………………………19 3．2 培养用液的准备……………………………………………………………………19 3．3 诱导多能干细胞(iPSC)的定向诱导分化………………………………………21 3．4 检测与统计…………………………………………………………………………22 4． 实验结果………………………………………………………………………………．．29 4．1 诱导分化过程中光镜形态观察及双硫腙染色结果………………………………29 4．2 逆转录酶一聚合酶链反应结果……………………………………………………．33 4．3 胰岛素分泌功能测定结果…………………………………………………………34 4．4 免疫荧光法检测结果………………………………………………………………39 5． 讨论…………………………………………………………………………………………………………………．z13 6． 结论…………………………………………………………………………………………………………………．45