大白菜CMS雄性不育发生相关基因的克隆与分析.pdfVIP

第42卷第12期 西北农林科技大学学报(自然科学版) V01．42No．12 2014年12月 JournalofNorthwestAF Dec．2014 University(Nat．Sci．Ed．) 网络出版时间：2014—1i-0415：58 DOI：10．13207／j．enki．jnwafu．2014．12．024 大白菜CMS雄性不育发生相关基因的克隆与分析 许小勇1’2，孙希禄1，方智远3，张鲁刚1 (1西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室，农业部西北地区园艺作物生物学与种质资源创新重点实验室， 园艺学院，陕西杨凌712100；2山西农业大学园艺学院，山西太谷030801；3中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081) [摘 要] 【目的】筛选和克隆与大白菜CMS雄性不育相关的应答基因。【方法】以大白菜不育系06J45和恢 RACE技术对该差异表达基因进行克隆，对基因序列进行生物信息学分析，并利用qRT—PCR定量分析不育株和可育 株花蕾发育过程中基因表达的变化。【结果】在FzSs可育株花蕾eDNA混合池中扩增出l条特异表达条带，通过 407 3’RACE和5’RACE克隆得到相应的BrUP基因，全长1bp，编码403个氨基酸残基。生物信息学分析表明， 酶基因，主要功能是进行糖基化修饰。qRT—PCR定量发现，BrUP只在花蕾发育早中期表达，且在大白菜不育株花蕾 发育早期其表达量显著性下调。【结论】成功筛选克隆获得1个与大白菜雄性不育发生相关的功能未知基因BrUP。 [关键词]大白菜；细胞质雄性不育；基因表达与克隆；信息学分析 [中图分类号]$634．103．3[文献标志码]A Cloneand ofCMSrelatedof Chinese analysis geneheading cabbage XU Xi—lul，FANG Xiao—yon91”，SUN Zhi—yuan3，ZHANGLu—gan91 (1State Stress Arid HorticulturePlant and Create KeyLaboratoryofCrop Biologyfor Area，KeyLaboratoryof BiologyGermplasm inNorthwest Horticulture，NorthwestAF 712100，China； China，MinistryofAgriculture，Collegeof University，Yangling，Shaanxi 2 Horticulture，Shanxi 030801，China；3Institute Collegeof AgriculturalUniversity，Taigu，Shanxi of and 100081，China) Flowers，ChineseAcademyofAgriculturalSciences(CAAS)，Beijing Vegetables aimedtoscreenandclone male Abstract：[Objective]Thisstudy cytoplasmic of Chinese eDNA—AFLP wasusedtoscreenand geneheading cabbage．[Method]Thetechn