2011年8～9月兴安盟扎赉特旗人间炭疽及炭疽杆菌的分离鉴定.docVIP

精品论文 参考文献 2011年8～9月兴安盟扎赉特旗人间炭疽及炭疽杆菌的分离鉴定 季开萍1 东晓辉2 海岩3 金华瑞3 （1.兴安盟乌兰浩特市疾病预防控制中心 内蒙古乌兰浩特市137400；2.兴安盟扎赉特旗疾病预防控制中心 内蒙古乌兰浩特市137400；3.内蒙古疾病预防控制中心 内蒙古乌兰浩特市137400） 【中图分类号】R378.7+2 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）16-0250-02 炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的一种人畜共患的急性传染病[1]。人类炭疽主要是由于接触病、死畜或其皮毛而受感染。本病的主要传染源是患畜，当患畜处于菌血症时，可通过粪便、尿、唾液及天然孔出血等方式排菌，如尸体处理不当，造成大量菌散播周围环境污染土壤、水源或牧场，尤其形成芽孢后可能成为长久的疫源地[2]。最常见的类型是皮肤型，通过受伤的皮肤和破损的粘膜感染。本病常呈地方性流行，干旱、多雨、洪水涝积都是促进炭疽爆发的因素。炭疽的发生也是不规律的，两次发生之间可能相隔很多年。2011年8～9月兴安盟扎赉特旗疑似皮肤炭疽病例数明显高于往年,共报告17例，以噬菌体裂解和青霉素敏感实验进行分离鉴定。 1 炭疽杆菌的分离鉴定 1.1 材料与试剂 1.1.1 材料 兴安盟扎赉特旗疾控中心共采集血液样本17份，渗出物样本17份。 1.1.2 试剂 营养肉汤（批号090710北京陆桥技术有限公司），营养琼脂（批京奥博星生物技术有限公司），炭疽菌诊断用噬菌体（批州生物制品研究所），革兰氏染液（批号080420北京陆桥技术有限责任公司），青霉素纸片（批号1104271北京天坛药物生物技术开发公司）。 1.2 实验方法 1.2.1 样本的采集 依据《WS 283-2008炭疽诊断标准》无菌方法采集疑似炭疽病人血液、皮肤渗出物。血液样本用5ml真空采血管采集，现场对皮肤渗出物进行压片并同时无菌棉签采集皮肤渗出物放入无菌50ml离心管中带回实验室。 1.2.2 显微镜检查 依据《WS 283-2008炭疽诊断标准》皮肤渗出物压片进行革兰染色，血液样本带回实验室后涂片染色同时分离血清保存，待样本片干后置显微镜下观察细菌形态。 1.2.3 炭疽杆菌的分离鉴定 皮肤渗出液及血液样本直接划线接种普通营养琼脂平板37℃培养，同时将样本在肉汤培养基中增菌培养。 病原鉴定：挑取灰白色不透明中等大小，不规律呈卷发状，表面毛玻璃样的可疑菌落划线接种于普通营养琼脂平板之上进行纯培养24h后挑取菌落密集划线2个普通营养琼脂平板，在划线区内滴加诊断用炭疽芽孢杆菌噬菌体和贴青霉素药敏纸片37℃孵育过夜或24h后能够见到明显的噬菌体裂解的噬斑和青霉素抑菌环，即鉴定为炭疽芽孢杆菌。 2 兴安盟扎赉特旗8～9月人间炭疽情况 自2011年8月以来，兴安盟扎赉特旗疑似皮肤炭疽病例数明显高于往年。从2011年8月20日～9月23日，扎赉特旗共报告皮肤炭疽病例17例， 无死亡病例。其中，疑似皮肤炭疽13例，临床诊断皮肤炭疽3例，实验室确诊皮肤炭疽4例。病例以8月25日至9月7日报告居多。具体病例报告情况见图1。 2011年8～9月炭疽病例覆盖兴安盟扎赉特旗6个乡（镇、苏木）9个村（屯、嘎查）,病例数报告如下：巴彦乌兰6例、胡尔勒3例、阿尔本格勒1例、罕达罕4例、绰勒1例和努文木仁2例，共17例。从人群分布来看男性(15/17)占绝大部分，主要以青壮年为主，占总病例数的82.35%。30～50岁年龄组人群发病14例，20-30岁年龄组人群发病2例，50岁以上人群发病1例。全部为农民。 3 结果 3.1 涂片染色结果 对皮肤渗出物直接压片17份和血液样本涂片17份进行革兰染色。在3份皮肤渗出物样本镜下直接观察到单个或偶有呈短链存在的革兰染色阳性、两端平整的大杆菌。血液样本涂片17份全部未观察到革兰染色阳性、两端平整的大杆菌。 3.2 分离鉴定结果 经培养17份血液样本均未长菌，17份病人皮肤渗出物均长出菌，挑取可疑菌落进行噬菌体裂解试验和青霉素敏感试验，结果鉴定出4株炭疽芽孢杆菌。 4 讨论 扎赉特旗位于兴安盟东北部，大兴安岭向松嫩平原过渡地带，嫩江右岸。总面积11155平方公里，全旗总人口40万。当地居民以种地、养殖牛羊为主要经济来源。虽然兴