RP-HPLC法测定烟叶中的茄尼醇含量.docVIP

精品论文 参考文献 RP-HPLC法测定烟叶中的茄尼醇含量 冷红琼 方娜 谢望时 徐文秀 郭亚东 （昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室 云南昆明 650500） 【摘要】实验采用反相高效液相色谱法，以甲醇-乙醇（75:25）混合溶剂做流动相，流速1.0mL/min，用PDA检测器于211nm处测定了烟叶原料及国内外烟草制品中茄尼醇的含量。方法的精密度为1.16%,回收率为94.3%～103.3%，RSD%为2.89%，茄尼醇进样量为0.05～1.00ug时，峰面积与进样量之间有良好的线性关系，相关系数为0.9999。 【关键词】反相高效液相色谱法 茄尼醇 烟叶 【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）16-0393-02 茄尼醇（Solanesol）化学名九聚异戊二烯醇，主要存在于茄科植物中，尤其在烟草中的含量较大[1]，其结构式见图1。因茄尼醇含有多个非共轭双键，对自由基的吸收性能非常强烈，不仅能够抗菌、消炎、止血，还是合成维生素K2和治疗心血管疾病、抗癌、抗溃疡等药物（如辅酶Q10）的主要中间体 [2-4], 将含长链烯基的茄尼醇连接在药物上（如抗癌药SBD），可使其获得优良性能[5]，还可以作为抗溃疡药物、抗癌药物的重要合成原料。茄尼醇是烟草中重要的萜类化合物之一，其与卷烟主流烟气中苯并[alpha;]芘的形成有关，备受烟草行业降焦减害研究者的关注。茄尼醇裂解过程中能产生柠檬烯（limonene）、法尼醇(fanesol)、3-羟基-2-丁酮(acetoin)等多种影响烟草吸味的香味成分[6]。 本文研究了运用反相高效液相色谱法测定烟叶中茄尼醇的含量，该方法操作简便，结果准确，基线平稳，保留时间合适，分离度好，可用于测定烟叶原料和烟草样品中茄尼醇的含量。 图1 茄尼醇结构式 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 Waters 2690 型高效液相色谱仪，包括泵,自动进样器,柱温箱,waters 996 PDA检测器，色谱工作站和Millinum32软件，T6328B 型万分之一电子天平（上海），超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。 甲醇为色谱纯（美国TEDIA公司，ge;99.9%)；乙醇为色谱纯（美国TEDIA公司，ge;99.9%)；茄尼醇标准品(阿拉丁，CAS:13190-97-1，纯度为97%)。 1.2 色谱条件 色谱柱waters C18(4.6 mm#61620;250 mm,5 mu;m)，以甲醇-乙醇（体积比为75:25）为流动相，流速： 1.0 mL/min,检测波长： 211 nm,进样量10 mu;L。 1.3 实验方法 1.3.1对照品溶液配制 精密称取茄尼醇标准品5.0mg, 置于10 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度, 得质量浓度为500 mu;g/mL的标准储备液。精密量取1mL标准储备液于10 mL容量瓶中，即得50 mu;g/mL的二级标准溶液。 1.3.2 供试品溶液配制 准确称取0.05 g烟末于100 mL磨口锥形瓶中,加入20 mL甲醇,盖上磨口塞，置于超声波清洗器中超声15 min,经0.45 mu;m微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。 2 结果与讨论 2.1 流动相的选择 实验过程中分别分别考察了甲醇-乙醇、甲醇-乙腈、乙醇-乙腈三种流动相系统,结果表明:甲醇-乙醇的体积比为75：25时,得到的HPLC色谱图具有较好的分离度，峰形较好且保留时间合适。 2.2 检测波长的选择 分别以200、205、211和220 nm 4个波长进行检测,发现200 nm波长处有最大吸收，但检测时噪音较大；211 nm波长检测效果最佳,茄尼醇峰几乎不受溶剂以及杂质的干扰,故选择211 nm作为检测波长。在选定的色谱条件下,茄尼醇对照品色谱图见图2，供试品色谱图见图3。 2.5 精密度试验 取对照品溶液按上述色谱条件,重复进样5次,每次进样10 mu;L,记录茄尼醇的峰面积,结果得出茄尼醇峰面积的RSD为1.16%。表明仪器精密度良好。 2.6 稳定性试验 精密吸取同一茄尼醇供试品溶液进样10 mu;L,每2 h进样1次,进样6次,测定茄尼