月桂树叶中蛋白质的提取工艺研讨.pdfVIP

第25卷增刊 分析测试学报 VoL25 of FENXICESHIXUEBAO(JournalInstrumental Nov．2006 2006年11月 Analysis) 月桂树叶中蛋白质的提取工艺研究 蓉2，宁啸骏2 王朝瑾1，马红青1，袁金凤1，林露1，郑 (1．上海水产大学食品学院，上海200090；2．上海市质量监督检验技术研究院，上海200233) Lour)是木犀属植物，原产我国，属我国传统十大名花之一，素以香花 桂花(Osmanthusfragrans 著称。桂花喜湿润，亦耐旱；喜阳光，亦耐阴；喜温暖，亦耐寒…。叶是植物进行光合作用和蒸腾作 用的主要部位，与周围环境有密切关系。桂花叶形较小，革质。 桂花花期不长，但品种繁多，花色多样，深受人们赏识。由于桂花适应性较广，它在园林风景和 庭园绿化美化及盆栽装饰中有着广泛的应用。另外，桂花在香料、药材、食品工业等方面开发潜力也 很大。在以往的研究中，主要集中于对桂花外部形态及开花习性等方面心]，而对其树叶中的有效成分 的研究则未见报道，更没有对其所含的具有重要生理活性的有效成分进行提取、应用的报道，使得来 源广泛的桂花树叶未得到有效地利用，为了对这一丰富资源进一步开发利用，笔者对其有效成分进行 了提取研究和检测。本文较为系统地研究了从桂花树叶中提取蛋白质的工艺，对充分利用这一宝贵植 物资源具有重要意义。 1 实验部分 1．1材料与仪器 桂花树叶，采自上海；盐酸、无水乙醇、甲醛、粉末状活性炭、氢氧化钠，均为分析纯。 机、冰箱、凯氏定氮仪。 1．2 测定方法 氨基氮(AN)含量与蛋白质含量均用凯氏定氮仪测定；氨基酸定性测定用双向纸层析；蛋白质产 率用所得蛋白质质量除以投入树叶质量表示。 氨基酸的定量测定用离子交换色谱一积分脉冲安培法。 1．3 实验步骤 将桂花树叶洗净、晾干、剪成小段，在粉碎机中粉碎后，放入装有温度计，回流冷凝器的蒸馏烧 瓶中，投料，加热回流、过滤，滤渣用少量稀盐酸浸泡，再过滤，重复两遍，集中3次滤液即得桂花 树叶水解液。将水解液赶酸，进行活性炭脱色试验，再过滤，即得脱色液。然后在脱色液中进行无水 乙醇沉淀试验，经结晶沉淀、过滤、烘干即得蛋白质晶体。 2结果与讨论 2．1酸水解工艺 一 2．1．1 液固比用20％盐酸在110℃水解7h，考查液固比 ．毒 对蛋白质产率的影响，结果见图1。由图1可知，随液固比增 垂适 大，AN含量先增加后减少，液固比为2时AN含量最高。说’要 。 明液固比小，酸用量少，会引起热传递不良，易焦糊、粘锅， 7h内蛋白质水解率低，故AN含量低；而液固比过大，盐酸 过多，会加速高酸下的副反应，所以AN含量又会降低。故液 固比选择2为宜。 2．1．2盐酸浓度以液固比2投料，在110。C水解7h考查盐酸浓度的影响，结果见图2。实验表明： 随酸浓度增加AN含量迅速增大。当浓度为20％时达最大值，而超过此值含量又缓慢下降。这可能是 基金项目：上海市重点学科建设项目资助(T1102) 一103— 第25卷 分析测试学报 增刊 因为酸浓度低时，水解时间短，蛋白质水解不完全；而浓度过高，水解生成的蛋白质又会被浓酸破坏， 生成无用的副产物，因而AN含量下降。所以最佳盐酸浓度为20％。 2．1．3水解时间在110。C、液固比为2、盐酸浓度20％ 条件下考查水解时问的影响，结果见图3、4。 由图3、4可知，随着水解时间的延长，AN含量和产 率递增，7h后又都逐渐下降。说明水解一定时间后，蛋白