新一代的饲用酶制剂——细菌性木聚糖酶研究.pdfVIP

木聚糖酶 新一代的饲厕酶制剂 细茴。性术聚糖酶 詹志春，程学慧，苏纯阳 (武汉新华扬生物有限公司，武汉430070) 摘要：本文论述了细菌性来源的木聚糖酶的生化特征、酶学特性、作用方式以及其作为饲 用酶的诸多优点。同时还阐述了木聚糖酶的作用机理，对细菌性木聚糖酶在饲料中的应用有 指导作用。 关键词：细菌性木聚糖酶；生化特征；酶学特性；作用机理 中的非淀粉多糖(Non—starch AX通常根据溶解性分为水溶性阿拉伯木聚糖(Warer-extractable 25％～30％)和不溶性阿拉伯木聚糖(Water-tmextractable 75％)。大量研究证实可溶性AX可增加小肠内容物黏度，从而阻碍营养物质与消化酶结合及营养物质 1996)；此外，植物原料中不溶性AX包裹淀粉、蛋白质等营养物质，阻止营养物质与消化酶的接触， 资源利用率、拓宽饲料资源和提高养殖经济效益具有重要意义。 木聚糖酶以其可有效降解阿拉伯木聚糖，消除阿拉伯木聚糖对动物的抗营养作用，已成为一种在 养殖业中广泛应用的酶制剂。但是，只有如下特点的木聚糖酶或木聚糖酶组合才能发挥其应有的作用： ①既可作用于可溶性木聚糖，又可作用于不可溶性木聚糖；②以内切酶为主，同时具备外切酶为辅助 酶。以往主要采用真菌性木聚糖酶，近年来，细菌性术聚精酶以酶解效率高等特点引起了业界的广泛 关注。以下就细菌性木聚糖酶的结构特征、生化特性、作用特点及其在饲料中的应用作一简要探讨， 为细菌性木聚糖酶的应用提供理论参考。 酶制剂篇瑞烈墟糕编研一 1细菌性木聚糖酶的生化特征 1．1酶源菌株 酶参与体内的许多生化反应，而酶的耐温性能往往与酶源菌株生活的适宜温度相关。目前，木聚 糖酶主要来源于细菌和真菌，其中大部分木聚糖酶来源于真菌，主要包括木霉属真菌、黑曲霉属真菌 和米曲霉属真菌等，而细菌来源的木聚糖酶目前相对较少，其中华扬Nutrex木聚糖酶来源于枯草杆菌。 细菌中更易于筛选出耐热性能好的产酶菌株。并且细菌属于原核微生物，其细胞结构及基冈重组简单， 易于利用基因工程及诱变育种筛选出高产菌株。 1．2结构特征 在分子水平上，木聚糖酶由功能或非功能结构域和连接区组成，功能结构域又可进一步分为催化 结构域和纤维素结合结构域(cellulose binding 决定酶的水解特性，并作为该酶分类的基础。木聚糖酶的氨基酸组成在数量上变化很大，但其催化结 构域趋向一致。CBD存在于许多木聚糖酶分子中，它在功能和氨基酸组成上与纤维素酶分子中的CBD 相似：①在靠近N末端和C末端分别有一个半胱氨酸；②除甘氨酸、天冬氨酸之外，还含有4个高度 保守的色氨酸残基；③带电荷氨基酸的含量较少(刘瑞田等，1998)。非功能结构域主要是连接序列。 连接区连接在催化结构域和CBD之间，并赋予了蛋白质结构的柔韧性。此序列的长度变化很大为6～ 59个氨基酸。该序列中或含有较多的脯氨酸，或带羟基的氨基酸，或两者都有。这些氨基酸被广泛的 O．糖基化。根据酶的来源不同，连接区的序列长度和它们所含有的脯氨酸和带羟基的氨基酸数量都不 同(胡沂淮等，2002)。 别组成高分子量和低分子景的木聚糖酶。10族内切木聚糖酶主要包括酸性和大分子的内切葡聚糖酶， 而碱性的和小分子的内切木聚糖酶则属于11族。 1．3生化特性 4～7，最适温度为40～60℃。 根据酶的理化特性，可分为两大类，即分子量小于30kDa的酶和分子量大于30kDa的酶，前者通 常为碱性蛋白，后者通常为酸性蛋白(Wood等，1988)。 2酶学特性 通常，木聚糖酶对多聚木聚糖的内部pl，4键有活性，这种木聚糖酶称为内切木聚糖酶。 木聚糖酶 水解以pl，4键连接的木聚糖、混合木聚糖的口．1，4键及其他13-1，4连接的其他多糖。大多数内切木聚糖能 特异性地作用于木聚糖的非取代木糖苷键，并释放取代的和非取代的木寡糖，而其他内切木聚糖酶特 异性作用于主链上的接近取代基团的木糖苷键。通过对10和11族内切木聚糖酶作用模式的研究，得 出：①l