人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及相关机制研究.docVIP

人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及相关机制研究 1376 ? 论着? 童堕皇11年5月第4o卷第14期 人参皂苷Rgl抗同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡 的作用及相关机制研究 贺国洋,李永真,李新强,朱慧芳,韩芳毅,千新来△ (新乡医学院病理学教研室,河南新乡453003) 摘要:目的探讨人参皂苷Rgl抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用及相关机制.方法 体外培养HUVECs细胞,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞 凋亡情况,逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblotting分析各组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和蛋白质的表达. 结果琼脂糖凝胶电泳显示:与对照组和Rgl组比较,Hcy组可见特征性DNA的梯状条带.TUNEL染色显示:与对照组和 Rgl组比较Hcy组细胞凋亡率增加差异有统计学意义(Plt;O.01);RT-PCR显示:与对照组和Rgl组相比,Hcy组eNOSmRNA 水平表达降低差异有统计学意义(Plt;o.O1);与Hcy组相比,Hcy+Rgl组eNOSmRNA水平表达增加差异有统计学意义(Plt; 0.01),但仍低于对照组和Rgl组,差异有统计学意义(Plt;o.01).Westernblotting显示:与对照组和Rgl组相比,Hcy组eNOS 蛋白水平表达降低差异有统计学意义(Plt;O.01);与Hcy组相比,Hcy+Rgl组eNOS蛋白水平表达增加差异有统计学意义(Plt; 0.01),但仍低于对照组和Rgl组,差异有统计学意义(Plt;o.O1).结论人参皂苷Rgl能够抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞 凋亡,此作用可能与上调血管内皮细胞eNOS水平有关. 关键词:人参皂苷;细胞凋亡;同型半胱氨酸;内皮型一氧化氮合酶 doi:10.3969/j.issn.1671—8348.2011.14.010文献标识码:A文章编号:1671-8348(2011)14—1376—03 InhibitingeffectsofginsenosideRglonhumanumbilicalveinendothelial cellsapoptosisinducedbyHcyanditsmolecularmechanism HeGuoyang,LiYongzhen,LiXinqiang,ZhuHuifang,HanFangyi,QianXinlai (DepartmentofPathology,XinxiangMedicalUniverserty,Xinxiang,Henan453003,China) Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibitingeffectofginsenosideRglonapoptosisofhumanumbilicalveinendothelial cells(HUVECs)inducedbyhomocysteine(Hey)anditspossiblemechanism.MethodsHUVECswereincubatedinvitro.Theagar— osege1electrophoresisandtheterminaldeoxynucleotidy1transferase-mediateddUTP—biotinnickendlabeling(TUNEL)wereapplied forthedetectionofapoptosisofHUVECstreatedwithHcyandRg1.RT—PCRandWesternblottingwereperformedtodetermine theexpressionofendothelia1nitricoxidesynthase(eNOS).ResultsTheresultsfromtheagarosegele1ectrophoresisdisplayedthat DNAladderwasseeninHUVECstreatedwithHcygroup.TheresultsfromtheTUNELstainingdisplayedthatcomparedtothe controlgroupandRglgroup.thenumberofapoptoticcellsinHcygroupincreasedsignificantly(Plt;0.01);comparedtotheHcy group,thenumberofapoptoticcellsintheHcy+Rg1groupdecreasedmarkedly(Plt;0.01),andtheapoptoticperce