饲料中蜡状芽孢杆菌的分离与鉴定.docVIP

饲料中蜡状芽孢杆菌的分离与鉴定 第27卷第4期 2009年8月 青海大学(自然科学版) JournalofQinghaiUniversity(NatureScience) Vo1.27No.4 Aug.2009 饲料中蜡状芽孢杆菌的分离与鉴定 张红见,韩志辉,董启伟 (青海大学农牧学院,青海西宁810016) 摘要:从西宁市某饲料厂随机采集饲料样品7O份,进行蜡状芽孢杆菌的常规分离培养与鉴定. 共检出阳性菌株3l株,检出率44.29%(31/70),31株分离株的生化试验结果与蜡状芽孢杆菌 完全一致,且3l株分离株都具有营养要求低,生长速度快的特点. 关键词:饲料;蜡状芽孢杆菌;分离鉴定 中图分类号iQ93—331文献标识码:A文章编号:1006—8996(2009)04—0069—02 IsolationandidentificationofBacilluscereusinfeedstuf1F Z姒NGHong—jian,HANzhi—hui,DoNGQi—wei (CollegeofAgricultureandAnimalHusbandry,QinghaiUniversity,Xining810016,China) Abstract:Bacilluscereusof70feedstuffsampleswereisolatedandidentifiedbymutineBacillusce. reusisolationandidentificationstechniqueforXiningXfoodstufffactory.eresultsshowedthat31 postiwestrainswereexaminedandbiochemicalpropertiesofallstrainswereassameasthoseofBa. cilluscereus.positiveratewas44.29%(3l/70).A11thestrainshavecharacteristicsoflownutrition andquickgrowth. Keywords:feedstuff;Bacilluscereus;isolationisdation 蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)是一种广泛分布于土壤,水,空气,植物,饲料和各类食品的好气,中 温,产芽孢的杆菌.据报道…,蜡状芽孢杆菌在食品样品检测时显示较高的阳性率.该菌常处于孢子 和休眠状态下,极易污染食物;一般不致病,但有的菌株可引起食物中毒.最近研究表明,本菌在自 然情况下可引起牛的乳房炎,骆驼的脓疱病,犬和猪的腹泻等;在特定的条件下也可引起人的急性 发作的呕吐综合征与其他食物引起的慢性腹泻综合征J. 由于蜡状芽孢杆菌污染的饲料和各类食品大多数感官性状正常,往往易被人们所忽略,因此,及时 了解蜡状芽孢杆菌的分布状况则显得尤为重要.为此,我们于2005年12月—2oo6年5月对从西宁市 某饲料厂采集的7O份饲料样品进行了常规分离培养与鉴定,现将结果报告如下. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1样品随机采集西宁市某饲料厂饲料70份. 1.1.2培养基普通营养肉汤培养基,普通琼脂培养基,鲜血琼脂平板,酚红葡萄糖肉汤培养基,半 固体培养基及各种生化培养基,均由青海大学农牧学院动物医学系传染病实验室自制. 1.2方法 1.2.1分离培养无菌称取饲料25g后置于灭菌研钵中研磨,加于225mL灭菌营养肉汤培养基,置 37℃温箱培养18～24h后勾取液体培养物分别接种于普通琼脂平板和鲜血琼脂平板上,置37~C温箱培 养l8—24h. 收稿日期:2009—04—20 作者简介:张红见(197O一),男,河南新乡人,副教授. 70青海大学第27卷 1.2.2涂片,染色及镜检挑取疑似菌落涂片,作革兰氏染色并镜检. 1.2.3细菌纯化及移植勾取少许疑似菌落接种于鲜血琼脂平板进行纯化培养,纯化后无菌移植到 鲜血琼脂斜面上,37℃温箱培养18—24h后置4℃冰箱备用. 1.2.4酚红葡萄糖肉汤厌氧发酵勾取少许疑似菌落接种于酚红葡萄糖肉汤培养基中,置37~C温箱 厌氧培养24～48h,观察结果. 1.2.5生化试验将获得的疑似目的菌株分别接种于葡萄糖培养基,乳糖培养基,麦芽糖培养基,甘 露醇培养基,蔗糖培养基,硫化氢培养基,枸橼酸盐还原培养基,V—P培养基,1VIR培养基,吲哚培养基, 尿素培养基,硝酸盐培养基,三糖铁培养基,半固体培养基,37~C下培养24h,观察试验结果. 2结果 2.1染色,涂片及镜检分离株为革兰氏阳性的大杆菌,菌体两端平整,多数呈链状排列,芽孢呈椭圆 形,位于菌体中央,不突出菌体. 2.2细菌形态及培养特性在普通琼脂培养基上菌落呈白蜡状,不透明,边缘不整齐,大小为3—4 m