大白菜“早熟5号”不定芽再生体系的优化.pdfVIP

江苏农业科学 2011年第39卷第5期 一 71一 史 超，王银娟，杜 丽，等．大 白菜 “早熟5号”不定芽再生体系的优化[J]．江苏农业科学，2011，39(5)：71—73 大白菜 “早熟5号不定芽再生体系的优化 史 超 ，王银娟 ，杜 丽 ，阚云超 ，高向阳 (1．河南农业大学 ，河南郑州450002；2．南阳师范学院，河南南阳473000) 摘要：选用大白菜品种 “早熟5号”为材料 ，分析了外植体 、苗龄、AgNO。和植物激素对其不定芽再生的影响。结 果表明：不同外植体类型中，采用4—5d苗龄的带柄子叶为外植体再生频率最高，添加AgNO 后在3～7mg／L的浓度 范围内外植体分化率大幅度提升，分化率最高达到78．33％，带柄子叶于Ms+6一BA5mg／L+NAA1mg／L+AgNO 3mg／L培养基上不定芽分化率最高 ，达到86．41％。 关键词：大白菜；不定芽 ；分化 中图分类号：$634．103．6 文献标志码：A 文章编号：1002—1302{2011)05—0071—03 大白菜属十字花科芸薹属，原产我国北方，现在全国各地 1 材料与方法 均有栽培。大白菜味道鲜美 ，营养丰富，我国科学工作者在其 杂交品种选育和抗病育种方面做了很多的的工作 ，并取得了 1．1 植物材料 很大的进展。如今 ，基因工程技术的应用为作物品种改 良提 大白菜品种 “早熟5号”(山东省莱州市金兴种业有限公 供了新的途径。大白菜和拟南芥同属于十字花科，和拟南芥 司提供)。 基因组序列的对比分析表明，大白菜有超过80％的基因结构 1．2 方法 和拟南芥具有同源性 ，这为大 白菜的转基因可行性奠定了基 1．2．1 无菌苗的获得 将大白菜 “早熟5号”的种子用70％ 础 。但如果没有一个 良好的再生体系，其转基因效率会大 乙醇处理30S，无菌水冲洗3—4次，然后用0．1％HgC1消毒 大降低。众所周知 ，和其他芸薹属植物相比，大白菜的植株再 7—8min，无菌水冲洗4—5次，接种于 MS培养基上进行发 生比较困难 ，因此国内外许多研究者对不同品种大白菜的 芽，培养条件 ：温度(26±1)℃、16h光照／8h黑暗。 再生能力进行了研究。虽然前人已经建立了一套完整的植株 1．2．2 外植体的获得 分别取3—7d苗龄的无菌苗，近生 再生体系，但是由于基因型的差异，不同品种的最佳试验条件 长点处取无菌苗的带柄子叶、下胚轴和子叶切块等外植体，插 不尽相同 。。本试验以常见大白菜品种 “早熟5号”为研究 入不同的培养基 ，培养条件为温度 (26±1)℃、16h光照／8h 对象，建立了一个适合该品种的高效植株再生体系，为转基因 黑暗。采用 (3)正交试验设计，对6一BA、NAA、AgNO 浓 研究提供 良好的基础。 度进行了交互3水平筛选 (表 1)，每处理重复 1～2次。约 20d后观察不定芽再生情况。 表 1 早熟5号不定芽诱导正交试验 L9(3)因素水平 收稿 日期：2010—11—19 基金 项 目：河 南 省 高 校 科 技 创 新 人 才 支 持 计 划 (编 号： 2010HASTIT011)。 作者简介：史 超 (1985一)，男，河南安阳人 ，硕士研究生。从事植物 转基因及安全性评价研究。E—mail：shicha126．corn。 通信作者：高向阳，教授，主要从事食 品分析 、食品资源开发研究。 E—mail：ndgaoxy@ 163．COIll。 (上接第70页) 9．3；生根的最佳培养基为 1／2MS+活