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DLLME-TLC快速检测血、尿中有机磷农药 第28卷第1期 2010年2月 实验与检验医学 EXPERIMENTALANDIAB0RAT0RYMEDICINE ? 31? Vo1.28No.1 Feb.20lO ? 实验研究? DLLMEmTLC快速检测血,尿中有机磷农药 滕军 f贵阳医学院公共卫生学院.贵州贵阳550004) 摘要:目的运用分散液一液微萃取技术,建立快速测定血,尿中敌敌畏,乐果,马拉硫磷,乙基对硫磷等有机磷农药的新方 法.方法常温下,于5ml尿,5g血中加入lml丙酮,80三氯甲烷,萃取2min后,静置lmin,吸取萃取剂三氯甲烷用薄层色 谱法进行定性.结果在选定条件下,与公安部行业标准GA/T101—1995中薄层色谱法比较,样品前处理由原来的至少2h缩 短为8min,有机磷农药检出限由200~g降低为尿21~g/ml,血6g,g.结论该方法操作简单,省时,对环境友好,成本低,可快 速测定血,尿中有机磷农药. 关键词:分散液一液微萃取;薄层色谱法;有机磷农药;血;尿 中图分类号R446.12+2,R44611,R595.4文献标识码A文章编号1674—1129(2010)01—0031—02 有机磷杀虫药(organophosphoruspesticides.on 是一种杀虫效力强,对植物药害较小的人工合成有 机磷酸酯类化合物,在我国农村被广泛运用.但因 大量和不科学使用,其中毒事件时有发生.目前.常 见的有机磷农药快速测定方法有:光谱法,免疫分析 法,酶抑制法和生物传感器技术[棚等.血,尿中有机 磷农药提取常用方法有:液一液萃取和固相萃取I4匐 两种方法近年来发展了顶空固相微萃取[71技术这 些方法都存在操作繁琐.耗时长或需要使用大量对 人体有毒有害,引起环境污染的有机溶剂.Rezaee 等于2006年首次报道了分散液一液微萃1~(disper. sireliquid—liquidmicroextraetion,DLLME)技术. DLLME用于血,尿中有机磷农药的提取在国内还未 见报道本实验应用DLLME与薄层色谱法[sl(thin layerchromatography,TLC)技术相结合,建立了血, 尿中敌敌畏,乐果,马拉硫磷和乙基对硫磷4种有机 磷农药的快速定性方法本方法不需要特殊装置和 昂贵大型仪器设备.便于在基层推广.适于对样品进 行快速初步筛查 1材料与方法 1.1仪器与试剂XW一80A型漩涡混合器f江苏海 门麒麟医用仪器厂).AR1530/C型电子天平f美国 OHAUSCORP),硅胶板(青岛海洋化工厂分厂):乐 果标样由国家农药质检中心提供.含量gt;199.0%:敌 敌畏,马拉硫磷,乙基对硫磷均由天津农药股份有限 公司提供.上述4种农药均用丙酮配制成浓度为 作者简介:滕军,女,1964年1l出生,本科,高级实验师,主 要从事理化卫生检验工作. 10mg/ml或20mg/ml的储备液.在冰箱中保存.临用 时用丙酮稀释成浓度为lmg/ml标准应用液 显色剂:溴酚蓝一醋酸试剂,间苯二酚一氢氧化 钠试剂 展开剂:三氯甲烷一丙酮(4:1),苯一石油醚一丙酮 (7:2:1) 丙酮,三氯甲烷,苯,石油醚,无水乙醇,溴酚蓝, 醋酸,间苯二酚,氢氧化钠,硝酸银等均为分析纯,实 验用水为MiniQ超纯水 1.2方法 1.2.1尿液中农药提取取两份5ml尿液于2支 10fI1l具塞比色管中,分别加入lm1分散剂丙酮.混 匀,再加入8Ol萃取剂三氯甲烷,小心振摇2min, 静置lmin.吸弃上层尿液.用玻璃毛细管吸取管底 部的萃取剂三氯甲烷进行定性分析 1.2.2血液中农药提取称取两份全gn(~t块捣碎, 各5g放于50ml烧杯中,分别加入5ml纯水,lml丙 酮,在漩涡混合器上混合30s.将上层液体转入2支 10ml具塞比色管中.各加入801~1三氯甲烷.小心振 摇2rain,静置lmin,吸弃上层液体.剩余的萃取剂转 入2个10ml小烧杯中,于小烧杯中加入0.2～0.4g无 水硫酸钠,拌匀,再加入80l三氯甲烷反提,稍候, 待反提剂浓缩至1020即可用于定性分析. 1.2.3定性按GA/T101—1995t~中薄层色谱法进 行定性分析.将两份平行样品农药提取剂分别点样 于两块硅胶板上.并在两块板上点上相应的几种农 药标准液,然后分别在两种展开剂中展开.取出.挥 干展开剂,进行显色.含硫有机磷农药用溴酚蓝一醋 ? 32? 第28卷第1期 2010年2月 实验与检验医学 EXPERIMENTALANDLABORAT0RYMEDICINE V01.28No.1 Feb.2010 酸试剂显色.敌敌畏用间苯二酚一氢氧化钠试剂显 色.最后将样品斑点与标准斑点进行比较,根据斑 点Rf值大小定性.斑点颜色深浅和大小半定