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专题22 微生物的利用
考纲要求
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特色梳理
选考提升
1.培养基及无菌技术
(1)微生物对培养基的需求
大肠杆菌的培养和分离
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特色梳理
选考提升
(2)常见无菌操作
a.对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。
b.对于不能加热灭菌的化合物,如尿素等,只能用G6玻璃砂漏斗过滤。
c.实验操作过程中,一般采用灼烧对接种环和玻璃刮刀进行灭菌。
d.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰旁进行。
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2.大肠杆菌的培养和分离的实验操作
特色梳理
选考提升
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特色梳理
选考提升
典例精析1下列有关高压蒸汽灭菌的叙述,错误的是 ( )
A.用于分离微生物的土壤样品必须高压蒸汽灭菌
B.灭菌前要将培养皿用牛皮纸或报纸包扎
C.为达到良好的灭菌效果,一般在压力为1 kg/cm2,温度为121 ℃的条件下,维持15 min
D.当灭菌锅压力与大气压相同时,可以打开锅盖将灭菌物品拿出来
解析 用于分离微生物的土壤样品不能使用高压蒸汽灭菌,否则会导致样品中微生物全部死亡,而分离不到微生物,A项错误;灭菌前要将培养皿用牛皮纸或报纸包扎,B项正确;为达到良好的灭菌效果,一般在压力为1 kg/cm2,温度为121 ℃的条件下,维持15 min,C项正确;当灭菌锅压力与大气压相同时,即灭菌锅内没有压力了,可以打开锅盖将被灭菌物品拿出来,D项正确。
A
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选考提升
知识强化教科书灭菌方式的归纳
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特色梳理
选考提升
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选考提升
易错警示(1)若配制的培养基中有葡萄糖,为防止葡萄糖分解碳化,一般要用500 g/cm2压力(90 ℃以上)灭菌30 min;不能加热灭菌的化合物,如尿素等,只能用G6玻璃砂漏斗过滤。
(2)使用高压锅灭菌,计时时间不是高压锅通电后,而是有压力后开始计时灭菌15 min;灭菌结束,不是灭菌锅压强降为0停止,而是与大气压相同时打开锅盖。
(3)对于培养基pH的调节,需在灭菌之前。
(4)检测培养基灭菌是否彻底,最简便的方法是空白接种,即将未接种的培养基放在适宜温度下培养一段时间后观察是否有菌落生长,若培养基中出现菌落,说明培养基灭菌不彻底或被污染,反之说明培养基灭菌彻底。
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特色梳理
选考提升
典例精析2划线分离和涂布分离是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是( )
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B.划线分离是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C.涂布分离是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D.都会在培养基表面形成单个的菌落
解析 划线分离不需要进行梯度稀释,A项错误;划线分离不需要进行梯度稀释,划线分离是将菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,B项错误;涂布分离是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面,C项错误;划线分离和涂布分离都能在培养基表面形成单个菌落,D项正确。
D
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特色梳理
选考提升
知识强化划线分离和涂布分离操作比较
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特色梳理
选考提升
典例精析3(2017浙江温州期末)生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题。
(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用 (液体)进行一系列的梯度稀释。将稀释后的水样分别用 涂布到 培养基表面上,然后将培养皿 于恒温培养箱,在 ℃条件进行培养。
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特色梳理
选考提升
(2)下图表示利用 分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是 。
A.步骤①倒平板操作时,只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行
B.步骤②③使用的工具是接种环,接种前需在明火上烧红后冷却
C.步骤④恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次
D.该方法使单菌落更容易分开,但操作复杂些
答案 (1)无菌水 玻璃刮刀 LB固体 倒置 37
(2)划线 B
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特色梳理
选考提升
解析 (1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释。将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基。为了防止冷凝水污染培养基,因此需要将培养基倒置于恒温培养箱,在37 ℃条件进行培养。(2)根据④中结果可知,图示表示利用划线分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤。步骤①倒平板操作时,需要在酒精灯火焰旁进行,A项错误;步骤②③中的接种环需要进行灼烧灭菌,即在火焰上灼烧后,待冷却后才可以蘸取菌液进行平板划线,B项错误;步骤④恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中划线4次,但是只蘸取菌液1次,C项错误;划线分离操作简单方便,但是单菌落不易分离,D项错误。
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特色梳理
选考提升
知识强化
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