微重力下植物细胞电融合技术的研讨.pdfVIP

微重力下植物细胞电融合技术的研究 黄静1 赵琦1 赵玉锦2 孙艳3 张世煌2 庄连源3 1首都师范大学生命科学学院，北京，100037； 2中国农科院作物科学研究所玉米研究中心，北京，100081； 3北京航空航天大学生物工程系．北京100083 关键词微重力 细胞电融合原生质体 目前，世界空间大国都把发展空间生命科学作为发展空间科学技术的重要领域，特别是微重力条件 下的研究和利用已成为焦点之一【”．空间徽重力环境没有重力沉降和热对漉等影响．为因重力限制而 难以发展的细胞融合技术提供了新的机遇．随着我国“神舟”系列载人航天飞船的相继发射和顺利返 回，我国航天生命科学的研究也在不断深入发展．其中植物烟草黄花品种叶肉原生质体与烟草革新一号 叶肉细胞脱液泡原生质体的空问电融合实验的成功，为我国进一步培育空间作物新品种建立了良好的 基础． 一、微重力环境与细胞电融合 从研究生命现象的特殊角度来看，空闻微霞力环境是难得的条件和资源．也是空间生命科学研究的 一个重要领域。细胞融合技术作为生物空间加工技术之一。具有很强的实用性．植物细胞工程中可通 过体细胞融合克服远缘杂交不亲和性来培育植物新品种，而动物细胞可通过产生特定抗体的B淋巴细 胞和骨髓瘸细胞融合获得实用的单克隆抗体杂交精细胞，因此空间大国都把它列入了空间站应用研究 的重要课题¨】． 细胞融合大体上分为化学诱导融台、生物诱导融合和电融合三类。电融合在空间实验中有很大的 优势；①群体细胞的融合过程可同步进行；②除电场强度和处理时问的影响外。介质中没有其他影响细 胞活力的因素；③在空问实验中具有可操作性等o]． 20世纪70年代以来．利用电融合产生体细胞杂种植株已有不少报道，但由于杂种细胞的融合率较 低．使得这项技术在生产上的应用潜力难以发挥．地面上导致细胞融合率较低的原因主要有t①两种亲 本原生质体的密度差异使原生质体在同一种介质中难以充分混合．因而异种细胞接触并融合的几率大 大减少I②植物细胞中j肾重力方向移动的细胞器，如淀粉体。其细胞的重心往往不在细胞的中心．放导致 融台电压才能使细胞融合。而较高的电压刺激又会造成细胞的损伤，降低融合细胞的活力，因而陷于两 难困境I④成熟的植物细胞一般都含有较大的液泡。其{瘦泡膜和细胞膜紧密接触。由于地面上存在着热 对流．在电融合过程中．脉冲会导致两种膜同时发生穿孔，在细胞膜破裂(membr¨e 间，细胞内液泡中的电解质会发生外泄．导致融合细胞的活力下降[．’5]． 相对而亩．在空闯徽重力环境中．由于不存在重力沉降和热对漉的影响，细胞电融合条件得到了改 善．杂种细胞的融合得辛也有明显提高． ·39· 二、空间微重力环境下的植物细胞电融合 (一)微重力可提高杂种细胞融合得率 最初是由zi姗e咖咖等人受空间材料学的启发，利用空间微重力条件改进细胞融合技术。他们先后 (TEXUs22，1988年)[”． 在植物方面．最初是由HamppR．等人利用去液泡和未去液泡的烟第原生质体在德国探空火箭 (TExUS 多细胞融合产物也有所增加．融合细胞活力通过光下存活耗氧(1ight—depe“ent0x飓en 活力． 随后的空间电融合实验也都得到了较好的结果．见表1、表2． 衰I空问徽■力环境的鲴胞电融台研兜 ·D一2空同站的其他宴膻· 增加． 后能形戚愈伤组织)由∞“增加翻90“． ·40· 寰2我国。神舟●号。飞船上的空问电t台实t(2∞2】【．】 莲l毪行对同6无18小封-竹篮方拭为棚膳棱囊色捷 从表1、表2可以看出．空间条件下的植物细胞电融合实验均得到了较好的结果。实验表明，空间 微重力环境下异源细胞融合得率和融合细胞活力率均宥所增加，很好地证明了空间微重力环境是改善 细胞电融合技术的熏要途径．空间电融合异源细胞融合得率的增加在一定程度上是由于没有重力沉降 和热对漉的影响．弥补了地面上细胞电融合的弊端l而杂种细胞活力增加可能是由于空问电融合排列时 阃缩短引起的u“”J． 那么在地面上利用徽重力回转器进行电融合的处理又是否能得到较高的融合牢呢?使得融合率提 高的机理是由于