宜昌地区结核分枝杆菌耐药状况的调查.docVIP

精品论文 参考文献 宜昌地区结核分枝杆菌耐药状况的调查 李鹏 刘江美 谭超（宜昌市中心人民医院 湖北宜昌 443002） 【摘要】目的 分析结核分枝杆菌对一线和二线抗结核药物的耐药水平，掌握耐多药结核病流行情况。方法 2010～2013年3年内宜昌市中心医院收集的3107株临床分枝杆菌，采用绝对浓度法在改良罗氏培养基上检测其对4种一线抗结核药和5种二线抗结核药的敏感性。结果 结核复合群2952株(95%),非结核分枝杆菌155株(5%)。3107株分枝杆菌对9种抗结核药的耐药率为RIF(48.50%)、INH(45.52%)、SM(31.85%)、EB(19.58%)、DIP(18.56%)、LVX(16.24%)、PAS(9.78%)、AMK(7.61%)、CPM(6.29%)。与2010年的报道相比,对INH、RIF、EB、LVX、DIP的耐药率均明显增高,Plt;0.01；对SM、CPM的耐药率增高无显著性差异，Pgt;0.05；而对AMK和PAS的耐药率明显降低，Plt;0.01。2952株结核杆菌中有耐多药结核菌(MDR2TB)和严重耐多药结核菌(XDR2TB)分别为1039和90株，分别占结核杆菌总数的35.19%和3.04%。其中MDR2TB数比2010年报道的32.02%略高。结论 结核杆菌对抗结核药耐药水平较高且有增高的趋势，MDR2TB和XDR2TB流行严重，有必要加强抗结核药物耐药性的监测，并采取有效的措施控制耐药菌的传播。 【关键词】 结核杆菌 耐药 耐多药结核 【中图分类号】R195 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0382-02 中国是全球22个结核病高负担国家之一，肺结核病人数居全球第二位。近年来,结核病的发病率和死亡率在我国27种法定传染病中均占据首位。[1]由于人口基数大,流动人口增多,耐多药结核菌(MDR2TB)和严重耐多药结核菌(XDR2TB)流行以及结核菌和HIV的双重感染,使结核病疫情日益严重。本研究回顾分宜昌地区的结核菌耐药状况,为结核病防治提供依据。 1　材料与方法 1.1　菌株　 2010～2013年从临床标本中分离的抗酸分枝杆菌3107株。结核杆菌标准菌株H37RV购自中国药品生物制品检定所。 1.2　主要试剂　 硫酸链霉素(SM)粉针剂(华北制药公司);异烟肼( INH)注射液(天津金耀氨基酸公司);利福平(RIF)纯品(上海信谊制药厂);盐酸乙胺丁醇(EB)纯品(上海信谊制药总厂);阿米卡星(AMK)注射液(上海信谊金朱药业公司);卷曲霉素(CPM)粉针剂(广西南宁中科药业公司);对氨基水杨酸钠(PAS)粉针剂(哈药集团制药总厂);左旋氧氟沙星(LVX)注射液(扬子江药业公司);对氨基水杨酸异烟肼(DIP)纯品(重庆华邦制药公司)。对硝基苯甲酸(PNB) (上海试剂一厂); 噻吩222羧酸酰肼(TCH, Sigma公司)。药敏试验及菌种鉴定培养基按照《结核病诊断细菌学检验规程》[2]自制。 1.3　含药培养基制备　 按规程提供配方制备改良罗氏培养基,灭菌前分别加入各种药物,每种药物均设高、低两个浓度,各药浓度分别为: SM10mu;g/ml、100mu;g/ml; INH1mu;g/ml、10mu;g/ml; EB5mu;g/ml、50mu;g/ml; RIF50mu;g/ml、250mu;g/ml; AMK1mu;g/ml、10mu;g/ml; PAS1mu;g/ml、10mu;g/ml; CPM1mu;g/ml、10mu;g/ml; LVX2mu;g/ml、20mu;g/ml; DIP 1mu;g/ml、10mu;g/ml; PNB最终浓度为500mu;g/ml; TCH最终浓度为5mu;g/ml。同时,留出一部分改良罗氏培养基用作空白对照。将各培养基分装入大试管内,每管5ml,平放在血清凝固器内90℃灭菌90min,制成斜面,冷却后取出置35℃培养24h,无菌生长方可使用。 1.4　菌悬液制备　 将2～3周菌龄的分枝杆菌用接种环小心取出,置于含0.5% Twe en80的无菌试管内,用无菌玻璃棒小心研磨成乳酪状,用无菌生理盐水稀释,并与麦氏比浊管比浊,配成湿重为1mg/ml的菌悬液备用。 1.5　接种方法　 将制备好的1mg/ml菌悬液作1∶100倍稀释后,各吸取0. 1ml分别接种于每支含药培养基的斜面上,各管接种量为