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宫颈HPV分型检测对宫颈癌早期诊断中的作用
精品论文 参考文献
宫颈HPV分型检测对宫颈癌早期诊断中的作用
夏林
(江苏省扬中市人民医院 212200)
【摘要】目的:探讨HPV分型检侧对宫颈癌早期的临床诊断价值。方法:选取2013年1月一12月于我院行液基细胞学检查不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及以上的患者共286例。其中,不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)者234例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)者43例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)者5例,鳞状细胞癌(SCC)4例,所有患者均进行HPV基因亚型检查,共21种亚型。结果:HPV检查阳性患者96例(33.57%)。其中,高危型患者31例(10.84%),来自ASCUS 、LSIL、HSIL及SCC患者分别为13例(4.55%)、11例(3.85%)、3例(1.04%)及4例(1.40%),平均年龄为(43.17plusmn;10.23)岁;低危型患者65例(22.72%),来自ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者分别为44例(15.38%)、19例(6.64%)、2例(0.70%)及0例,平均年龄(33.65plusmn;10.28)岁。结论:HPV分型检测是早期诊断宫颈癌的有效方法,与液基细胞学检测结合可以早期诊断宫颈癌,为患者提供早期治疗争取时间。
【关键词】液基细胞学 人乳头状瘤病毒 宫颈癌 早期诊断
【中图分类号】R730.4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)21-0120-02
近年来,宫颈癌的发病率逐年升高,尤其是在年轻妇女中的发生率更是明显升高。液基细胞学的应用明显提高了宫颈癌前病变诊断的准确性,对检查阳性的患者再行人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测,则可以进一步了解其类型,更好地筛查出高危型患者。本文就液基细胞学检查ASCUS及以上(阳性)的患者进行HPV基因亚型检测,以便更有效地进行宫颈癌的早期诊断。
1.研究对象和方法
1.1临床资料:
选取2013年1月-12月于我院行液基细胞学检查不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及以上的患者共286例。入选标准为:年龄21-83岁,平均年龄(45.39plusmn;15.47)岁,排除妊娠及急性生殖道炎症,24 h内无性生活,48 h内无阴道用药史,至少半年内未进行任何宫颈病变诊断和治疗方法处理,所有患者均进行HPV检测。其中,不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)者234例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)者43例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)者5例,鳞状细胞癌(SCC)4例。
1.2检测方法:
宫颈细胞学诊断依据TBS[1](The Bathesda System)诊断标准。细胞病理学检查宫颈细胞涂片标本由妇科门诊医师统一采集,并统一由病理科分析诊断。
1.2.1主要试剂与仪器:
Thinprep液基细胞学检测仪,HPV分型基因芯片试剂盒,电子阴道镜为SLC-2000B型。
1.2.2液基细胞标本采集及处理:
采用专用塑料刷收集患者宫颈外口和宫颈管的脱落细胞,装入盛有Thin-Prep细胞保存液的小瓶中。保存液中的标本经ThinPrep 2000系统程序化处理(将标本中的黏液、血液和炎细胞与上皮细胞分离,经高精密度滤器过滤后转移到静电处理过的载玻片上[2]),制成直径为2cm的薄层细胞涂片,用95%酒精固定,行巴氏染色,最后中性树胶封片。
1.2.3 HPV检测实验方法:
采用HPV核酸扩增分型检测系统进行HPV基因亚型的检测(21种)。将剩余标本转移入1.5 mL微量离心管中,用14 000r/分离心5 分钟后弃去上清液,管底的细胞块用50u L裂解液悬浮,100℃水浴加热15分钟, 14 000r/分再次离心5 分钟,取上清液进行PCR扩增、杂交、洗膜及显色[3]。HPV分型检测:分为高危型和低危型[4](高危型亚型:16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68;低危型亚型:6,11,42,43,44,CP8304)共21种基因型。
1.3观察指标及判定方法:
细胞学诊断标准采用TBS诊断标准。其中,ASCUS、 LSIL、 HSIL及SCC为细胞学检查阳性,即(+)。HPV-DNA扩增结果判定采用肉眼观察检测结果的方法。HPV单一感染时,在膜芯片上相应HPV亚型探针位点处可
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