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TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX-S-N的构建及体外表达.pdf
254 中国兽医学报2009年3月第29卷第3期ChinJVetSciMar.2009V01.29No.3
TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX—S—N的构建及体外表达
杨 恒,曹三杰,黄小波,文心田’,秦学远 (四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室NJll省动
物疫病与人类健康重点实验室,四JII雅安625014)
以脂质体转染法转染CoS7细胞,间接免疫荧光检测转染后细胞外源基因的表达情况。结果表明,重组质粒构建
正确且在COS7细胞中得到表达,转染的细胞呈现特异性荧光。真核表达质粒pVAx-孓N的成功构建为进一步研
究TGEV核酸疫苗奠定了物质基础。
关键词:猪传染性胃肠炎病毒;S基因;N基因;构建;真核表达
中图分类号:S852.65 文献标识码:A 文章编号:l005—4545(2009)03一0254-04
Constructionand ofTGEVchimeric
expression plasmidpVAX——S·_N
YANG Xiao-bo,WENXin-tian’,QIN Ani—
Heng,CAOSan-jie,HUANG of
and Animal and
mal Disease DiseaseHumanHealth
Infectious Microarray,KeyLaboratoryof of
Sichuan Medicine,Sichuan
Province,CollegeofVeterinary Agricultural
chuan
625014,China)
siteofSandN oftheSC—HstrainofTGVEwas RT·PCR
Abstract:Theimportantantigen genfs amplifiedby
was
andclonedinto vector,therecombinantnamed19T—Sand19T-N,whichwasidentifiedrestriction
pMnl9T by
and theSandN wereCUtfromtherecombinant19T-Sand in—
sequenced.Thengenes plasmid 19T-N。further
enzyme
sertedintothe vector S/Nchimeric identi-
expressionpVAXlgot eukaryoticexpressionplasmidpVAx_§N.After
weretranfectedintoCOS7
fled restrictionandPCR。therecombinant cells,the ofre—
by enzyme plasmids expressions
combinantwereconfirmedindirectimmunofluorscenceresultsshowedthatthe ex—
plasmids by
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