稀酸水解玉米皮制备丁二酸发酵糖液的研究.docVIP

稀酸水解玉米皮制备丁二酸发酵糖液的研究 DANDFERMENTAT10NINDU 稀酸水解玉米皮制备丁二酸发酵糖液的研究 姜岷,姚嘉雯,吴昊,万永敏,陈可泉,孙娜娅,于丽 (南京工业大学制药与生命科学学院,江苏南京,210009) 摘要研究了稀酸水解玉米皮制备丁二酸发酵糖液的工艺条件,通过正交试验及优化调整得到稀酸水解玉米 皮的优化工艺条件:水解温度l1O,加酸量l%,粒径20~40目,反应时间90min,总糖收率9O.37,总糖浓度 85g/L.其糖液经活性炭脱色,脱色率达92.27,脱色的总糖损失率低于5%,糠醛含量仅为0.236g/L.经厌 氧发酵实验初步验证,玉米皮水解液可替代葡萄糖作为丁二酸发酵的碳源. 关键词玉米皮,酸水解,丁二酸,发酵 随着石油,天然气,煤炭等石化资源的日益枯竭, 生物质资源以其储量丰富,可再生等优势,将成为一 种重要的替代资源_1].玉米皮是玉米深加工过程的 副产物,占玉米籽粒质量的1O～14,主要成分为 淀粉,半纤维素及纤维素Ez].目前我国玉米皮利用 率较低,只有部分被用作饲料[3],是一种潜在的廉价 生物质资源.丁二酸又称琥珀酸,是一种重要的化工 原料,在医药,食品,化工等行业具有广泛的用途,目 前一些高产丁二酸的菌株,可以利用葡萄糖,木糖等 作为碳源E.因此,如能利用玉米皮水解生成的葡 萄糖,木糖的混合糖液作为碳源,用于厌氧发酵制备 丁二酸,将有效减少丁二酸发酵碳源对淀粉类原料的 依赖性,并可降低原料成本. 纤维素类生物质的水解工艺l5],一般可分为酸 水解法和酶水解法.酶法具有水解条件温和,不产生 抑制物的特点,但目前高效纤维素酶的成本昂贵,水 解周期长,制约了该工艺的推广.酸水解法又分为浓 酸水解法和稀酸水解法,浓酸水解对设备要求很高, 并且浓酸的分离增加了工艺复杂性和生产成本;而稀 酸水解工艺简单,酸用量少,成本较低. 实验以玉米皮为原料,对稀酸水解玉米皮制备丁 二酸发酵糖液的工艺条件进行了研究,制备出高品质 的糖液,并对其替代葡萄糖作为丁二酸发酵碳源进行 了初步验证. 1材料和方法 1.1仪器与试剂 第一作者:博士,副研究员. *国家高技术发展计划”863”(No,2006AA02Z235),国家自然科 学基金资助(No,国家自然科学基金重点项目 (No,江苏省高校自然科学研究计划 (No.05KJB180043)资助 收稿日期;2007—05一儿 I 6l2007Vol33NO10(Total238)l’....’———————.....’’’—————’’....’——————’.’’—————————’..—— 1.1.1仪器 752型紫外可见光分光光度计,上海启威电子有 限公司;SBA-40C型生物传感分析仪,山东省科学院 生物研究所研制;高效液相色谱仪(426HPLC pump,Alhech:UVIS22OI,LINEAR;PrevailC18, Alhech;WatersHPLC2010工作站). 1.1.2原料 玉米皮,山东正德食品有限公司提供(淀粉 15.37,半纤维素31.64,纤维素21.7O,木质素 3.6O,蛋白质9.94,灰分5.42,水分9.6O, 按参考文献I-6]中提供的方法测定);糖用活性炭,酵 母膏,玉米浆为工业级;H.SO,HC1,乙腈等均为化 学纯试剂;DNS显色液按文献[7]中的方法配制备 用. 1.2实验方法 1.2.1原料预处理 取干燥的玉米皮粉碎后备用,粒径为204100目 不等. 1.2.2稀酸水解玉米皮制备糖液及发酵制备丁二酸 的研究 将粉碎好的玉米皮,按一定料液比配制成反应料 液,反应后,真空抽滤,并用少量热水洗涤滤饼,合并 至滤液.在确定水解用酸,料液比的基础上,通过正 交试验探讨用酸量,粒径,反应时间和水解温度对玉 米皮水解液中总糖收率的影响,优化玉米皮稀酸水解 的工艺条件,并对水解糖液进行脱色精制,并对玉米 皮水解糖液替代葡萄糖用于厌氧发酵制备丁二酸的 可行性进行验证. 1.2.3总糖,糠醛及丁二酸含量的测定方法 按文献E.方法分别测定玉米皮水解液中的总 糖,糠醛以及发酵液中的丁二酸含量. 1.2.4色度的检测 精确移取1mL待测液,在比色管中稀释至1O mL,在一52Onto下测定其吸光度A,脱色率的定 义: 脱色率/一×100 ,10 式中:A.为未经脱色的玉米皮水解液的吸光度; A为脱色后的玉米皮水解液的吸光度. 1.2.5总糖收率 总糖收率/%一x100 U0 式中:G为玉米皮经稀酸水解得到的实际总糖含 量;Go为玉米皮中淀粉和半纤维素经稀酸完全水解 后得到的总糖理论含量. 1.2.6总糖损失率 总糖损失率/一×100 00 式中:S为经脱色后的玉米皮水解液中总糖含 量;S