铁过载催化的氧化应激对骨髓间充质干细胞的影响及其作用机制.pdf

中 国 医学 科 学 院 学 报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE · 论 著 · 铁过载催化的氧化应激对骨髓 间充质干细胞 的 影响及其作用机制 卢文艺，赵明峰，SajinRajbhandary，赵 楠，谢 芳，肖 霞，穆 娟，李玉明 天津医科大学一中心临床学院 天津市第一中心医院血液科，天津300192 通信作者：赵明峰 电话：022电子邮件：zmfzmf@hotmail．com 摘要 ：目的 探讨铁过载催化的活性氧 (ROS)生成对骨髓问充质干细胞 (MSCs)增殖和凋亡的影响及其可能的 作用机制。方法 体外培养MSCs，加入不同浓度 (100、200、400 moL／L)的枸橼酸铁铵 (FAC)，培养 12、24、48h， 建立铁过载模型，测定铁过载前后细胞内的不稳定铁池 (LIP)和ROS水平，并采用群体倍增时间 (DT)检测MSCs的 细胞增殖能力，采用AnnexinV．PI双标法检测细胞凋亡率，进行蛋白质印迹实验检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶 (P-p38MAPK)、p38MAPK、蛋白激酶B (AKT)及p53蛋白的表达情况。结果 铁过载组MSCs的LIP水平明显高于对 照组 (平均荧光强度482．49±20．96比303．88±23．37，P0．05)；ROS的水平随FAC浓度增加而升高，在加入FAC浓 度为400 moL／L时最高 (P0．05)。用400 moL／L的FAC分别处理 l2、24、48h的MSCsDT分别为 (1．47±0．11)、 (1．80±0．13)、(2．04±0．14)d，均明显长于对照组的 (1．204-0．05)d (P均0．05)。铁过载组MSCs的凋亡率也 明显高于对照组 [(3．51±1．17)％比 (0．66±0．62)％，P0．05]。与对照组比较，铁过载组P—p38MAPK、p38MAPK、 p53蛋白的表达增加，而AKT的表达无明显差异。结论 铁过载可通过提高骨髓MSCs的ROS水平来抑制其增殖、诱导 其凋亡，此过程可能与p38MAPK—p53信号通路的激活有关。 关键词：铁过载；间充质干细胞；活性氧；p38丝裂原活化蛋白激酶；p53 中图分类号：R551．3 文献标志码：A 文章编号：1000-503X(2013)叭-0006-07 DOI：10．3881／j．issn．1000-503X．2013．01．002 EffectandMechanism ofIron-catalyzedOxidativeStressonMesenchymalStem Cells LUWen-yi，ZHAOMing—feng，SajinR~bhandary，ZHAONan，XIEFang，XIAOXia，MUJuan，LIYu—ming DepartmentofHematology，TianjinFirstCentralHospital，theFirstCentralClinicalCollegeof TianjinMedicalUniversity，Tianjin300192，China Correspondingauthor：ZHAO Ming·feng Tel：022E-mail：zmfzmf@hotmail．eom ABSTRACT：Objective Toexploreeffectofironoverloadontheproliferationandapoptosisofmesen- chymalstemcell(MSCs)andthepossiblemechanism．Methods Ironoverloadmo