一种基于荧光图像的体外抗肿瘤药物快速筛选方法-浙江大学学报.pdfVIP

第４０卷　第６期 浙 江 大 学 学报 （医学 版 ） Ｖｏｌ４０　Ｎｏ６ 　 ２０１１年 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＺＨＥＪＩＡＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ） 　 ２０１１ ｈｔｔｐ： ｗｗｗ．ｊｏｕｒｎａｌｓ．ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ／ｍｅｄ ＤＯＩ：１０．３７８５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８９２９２．２０１１．０６．００８ ∥ 一种基于荧光图像的体外抗肿瘤药物快速筛选方法 １ ２ １ 聂晓静 ，赵筱萍 ，王　毅 （１．浙江大学药学院，浙江杭州３１００５８；２．浙江中医药大学，浙江杭州３１００５３） ［摘　要］　目的：建立一种基于荧光成像的抗肿瘤药物体外快速筛选系统。方法： 采用二乙酸 ① 荧光素（ＦＤＡ）标记测定活细胞数法，评价２６个乌药组分对的体外抗肿瘤活性，并对本方法的线性 范围和精密度进行了考察； 在活性筛选结果的指导下，应用ＬＣ／ＭＳ对样品进行分析，初步推断药 ② 效活性物质。结果： 该方法在细胞密度为０～１００００／孔的范围内荧光强度与细胞个数线性相关 ① ２ （ｒ＝０．９８５８），板内的精密度为９．４１％； 在２６个乌药组分中，筛选得到两个抗肿瘤活性较强的组 ② 分Ｃ１３和Ｃ１５，抑制率均达到９０％以上。结论：本方法快速、稳定、简便、线性范围宽，可用于从复 杂中药组分中快速筛选抗肿瘤活性物质。此外，根据ＬＣ／ＭＳ分析结果并结合文献报道，推断乌药 中具有抗肿瘤活性的化合物为异波尔定碱。 ［关键词］　荧光素类；药物筛选试验，抗肿瘤；ＦＤＡ；抗肿瘤；乌药；筛选 ［中图分类号］　Ｒ９６５．１　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１００８９２９２（２０１１）０６０６１７０５ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇｂａｓｅｄ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｉｔｈａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙ １ ２ １ ＮＩＥＸｉａｏｊｉｎｇ，ＺＨＡＯ Ｘｉａｏｐｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｙｉ（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５８，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｒｅｃｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５３，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｄｅｖｅｌｏｐａｆｌｕｏｒｅｓｅｓｃｅｉｍａｇｉｎｇｂａｓｅｄｎｏｖｅｌｓｙｓｔｅｍｆｏｒｑｕｉｃｋｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆ ａｎｔｉｔｕｍｏｒｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ２６ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍＬｉｎｄｅｒａａｇｇｒｅｇａｔｅ ｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｒｅｌａｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒｏｆｖｉａｂｌｅｃｅｌｌｌａｂｅｌｌｅｄｗｉｔｈｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎｄｉａｃｅｔａｔｅ（ＦＤＡ）ｉｎｍｕｌｔｉｗｅｌｌ ｐｌａｔｅｓａｆｔｅｒｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｔｈｅｓｅ２６ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｌｉｎｅａｒｉｔｙａｎｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎｏｆｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄ ｗｅｒｅｖａｌｉｄａｔｅｄ．Ｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｉｔｈｓｔｒｏｎｇａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙｗｅｒｅ ２ ｄｅｄｕｃｅｄｂｙＬＣ／ＭＳ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｌｉｎｅａｒｉｔｙｏｆｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｆｏｒｃｅｌｌｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈＦＤＡｗａｓｖａｌｉｄａｔｅｄ（ｒ＝ ０．９８５８