BECKMAM COULTER 780全自动血细胞分析仪测定网织红细胞性能评价.docVIP

精品论文 参考文献 BECKMAM COULTER 780全自动血细胞分析仪测定网织红细胞性能评价 陈岩 许美玉 陶立安（吉林省吉林市吉化集团公司总医院检验科 182021） 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）06-0179-01 　　网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标，有显微镜目测法和仪器自动计数法。前者是手工操作，其重复性较差且费时，准确性也容易受到计数细胞多少、血涂片薄厚、红细胞是否均匀分布的影响；而后者是近年来应用越来越多的检测网织红细胞的方法。BECKMAM COULTER 780全自动血细胞分析仪具有检测网织红细胞的功能，作者予以评价。 　　1 材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1仪器 BECKMAM COULTER 780全自动血细胞分析仪 　　1.1.2试剂 BECKMAM COULTER公司原装进口检测网织红细胞试剂 　　1.1.3标本 收集本院住院病人，空腹，EDTA-K2抗凝全血 　　1.2方法 　　1.2.1线性 用生理盐水将网织红细胞高值标本用稀释液稀释成1:1、1:2、1:3、1:4、1:5不同比例，每种稀释度测定3次，取均值，计算出直线回归方程式。 　　1.2.2稳定性 将一份标本置于室温及4℃，分别在0、2、4、6、8、12、24、48和72h分析网织红细胞2次，各取均值（4℃标本，室温复温30min后测定）。 　　1.2.3重复性 选择网织红细胞百分比高、中、低标本各1份，每份重复测定10次，求其变异系数（CV），作批内重复性试验；取网织红细胞百分比高、低值各1份，连续测定10天，求其CV，作天间重复性试验。 　　1.2.4携带污染 将网织红细胞百分比高值标本（2.403%）连续测定3次，随后测定网织红细胞百分比低值标本（0.353%）3次，按（L1 ndash;L3）/(H3ndash;L3)times;100% 计算携带污染（L1、L3分别为低值第1、3次测定值，H3为高值第3次测定值）。 　　1.2.5精密度试验 　　1.2.5.1批内精密度：分别取三份不同RET水平标本，每份连续检测网织红细胞百分比10次，计算S值和CV值。 　　1.2.5.2批间精密度：每天分别检测二份不同RET水平标本两次，连续检测网织红细胞百分比10天。各计算S与CV值。 　　1.2.6与手工镜下计数的相关性 将20份住院病人标本，用手工法（X轴）与仪器法测定网织红细胞的绝对值（Y轴）作相关性统计学处理。 　　2 结果 　　2.1线性 每种稀释度的值为X轴，网织红细胞实测值为Y轴，其回归方程 Y=5.65+84.54X，相关系数为0.996。 　　2.2稳定性 标本收集后，在4℃和室温（25℃）下于0、2、4、6、8、12、24、48、72h分别测定2次，取均值。结果显示，无论是在室温或4℃，72h内网织红细胞百分比变化差异分析均无统计学意义。 　　表1 网织红细胞稳定性测试 　　 　　 　　2.4携带污染 携带污染（%）=（0.42-0.33）/(2.42-0.33) times; 100%=0.043%。 　　2.5精密度试验 　　1.2.5.1批内精密度：网织红细胞百分比结果显示S分别是0.064%、0.094%、0.254%；CV值为0.026%、0.087%、1.058%。 　　1.2.5.2批间精密度：网织红细胞百分比结果显示的SD分别是0.036%、0.030%；CV值为0.100%、0.448%。 　　2.6相关性 20份标本用手工法计数与仪器测定结果作相关性处理，其回归方程为Y=0.25+0.94X，相关系数为0.958 　　3 讨论 　　BECKMAM COULTER 780全自动血细胞分析仪测定网织红细胞是运用一种活性染料新亚甲蓝，对网织红细胞中嗜碱性物质（RNA、核糖体）进行着色；再用漂洗液漂去成熟红细胞的血红蛋白。在流式通道中，运用VCS三维技术分析染色后的网织红细胞。V-低频波，检测??胞体积，网织红细胞比成熟红细胞稍大；C-高频波（阻光性），检测细胞的内部成分，可剔除非红细胞；S-激光散射，将网织红细胞与成熟红细胞区分开来。网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡细胞，用煌焦油蓝染液经活体染色后，胞浆中的核糖核酸残余物质可呈现蓝色的网状，故名网织红细胞。红系造血起源于骨髓造血干细胞，再分化为原红细胞，经过早幼红细胞、中幼红细胞、晚幼红细胞转变为网织红细胞，在骨髓内停留2天后被释放入外周血中，网织红细胞一般在1天后失去细胞内的残留物质成为成熟红细胞[1