克班宁溶液和脂质体急性毒性研究.docVIP

精品论文 参考文献 克班宁溶液和脂质体急性毒性研究 陈玲玲 马云淑（通讯作者） 　　(保山中医药高等专科学校 678000) 　　【摘要】目的：探讨克班宁溶液和脂质体对小鼠急性毒性的影响。方法：观察小鼠给药后的毒性反应，并计算半数致死量(LD50)。结果：克班宁溶液小鼠腹腔注射、灌胃和克班宁脂质体小鼠静脉注射LD50分别为30.058mg/kg，49.936 mg/kg，LD50=16.085mg/kg。结论：改变给药途径或制成脂质体静注，均可以明显增加LD50，降低毒性。 　　【关键词】克班宁 脂质体 急性毒性 半数致死量LD50 　　【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）11-0257-02 　　克班宁（Crebanine,Cre）是一种异喹啉类阿朴菲型生物碱，主要存在于防己科千金藤属（Stephania）植物中[1，2]。本课题组前期药理学实验表明克班宁（5mg/kg与2.5mg/kg）具有良好的抗实验动物心律失常活性。但其静脉注射的半数致死量（LD50）为9.382mg/kg，静注LD50的95％可信限为8.314～10.600mg/kg[3]；且盐酸克班宁注射液及盐酸克班宁毫微粒的LD50分别为9.382mg/kg[4]和9.984mg/kg[5]。由于克班宁治疗指数较小，有较大的毒性且不够稳定，因而限制了其开发应用。 　　脂质体(1iposomes)是一种类似于生物膜结构的双分子层微小囊泡，可以包裹水溶性和脂溶性药物，主要材料是磷脂和胆固醇。脂质体作为药物载体能降低药物的毒性，同时也是一种很有临床应用价值的新剂型[6]。利用脂质体这一特点，课题组研究了克班宁脂质体最佳处方工艺，制作了合格的克班宁脂质体。 　　本文对克班宁溶液和其脂质体进行急性毒性研究，为进一步其开发利用和新药研究打下基础。 　　1 材料 　　1.1药品与试剂 　　克班宁（Crebanine,Cre)实验室自制，纯度98.7%；氯化钡（BaCl2，AR，北京化工厂生产）；水合氯醛 （AR 天津科密欧化学试剂有限公司，批；无菌生理盐水（昆明市宇斯药业有限责任公司，批；克班宁脂质体（实验室自制，包封率81.15％）。注射器（ 湖南平安医疗器械有限公司 ）。注射器（ 湖南平安医疗器械有限公司）。 　　1.2实验动物 　　小鼠，雌雄各半，体重18-22g（四川简阳实验动物中心 生产许可证：scxk（川）200824，合格证号：0017193，批号：0017193），饲养于云南中医学院实验动物室。 　　1.3实验仪器 　　2方法 　　2.1克班宁溶液的配制 　　精密称取克班宁结晶体125mg，用生理盐水溶解，用10%的HCL调PH4-6，超声30分钟使其完全溶解，配置成浓度为2.5mg/ml的Cre溶液。 　　2.2 LD50(半数致死量)的测定 　　2.2.1预实验 　　将12只小鼠（雌雄各半）随机分成3组，组间给药剂量比值1:0.8，找出引起小鼠0%（Dn）和100%（Dm）死亡的剂量，观察并记录给药后小鼠出现的现象。 　　2.2.2正式实验 　　以预试实验测得的Dn和Dm为参照，组间比值为1:0.8-1：0.9来设置6-7个剂量组，每组10只（给药前禁食不禁水12小时）。腹腔按50mg/kg（最大剂量）、灌胃按80mg/kg（最大剂量）克班宁溶液，静脉注射按21.6mg/kg（最大剂量）给药剂量给予克班宁脂质体给药，并记录给药后密切观察动物的各种反应及死亡时间及死亡数。 　　2.2.3 LD50计算 　　用Bliss法求出半数致死量（LD50）。 　　3结果 　　3.1克班宁溶液小鼠腹腔注射LD50 　　小鼠腹腔注射几分钟后，出现心动过速，跳跃、竖尾和惊厥、全身僵直，甚至小便失禁，个别出现口腔出血。Dn=24mg/kg，Dm=50mg/kg。回归方程y(Probit)=-18.694+16.031Log(D)；半数致死量LD50=30.058mg/kg，LD50(Feiller校正)95%的可信限=27.315-32.534mg/kg，LD5=23.733mg/kg，LD95=38.069mg/kg。结果见表1。 　　表1 克班宁对小鼠腹腔注射剂量与死亡率表 　　4讨论 　　克班宁小鼠灌胃、腹腔注射半数致死量LD50分比为49.936mg/kg、30.058mg/kg；克班宁脂质体静脉注射的LD50为16.085mg/kg；和课题组［3］前期已进行的克班宁溶液静脉注射半数致死量LD509.382mg/kg相比较安全指数大大提高，可见改