免疫细胞化学在液基细胞学中的应用及前景.docVIP

精品论文 参考文献 免疫细胞化学在液基细胞学中的应用及前景 汪贵方 陈满红 闵小琴（景德镇第二人民医院 江西景德镇 333000） 【摘要】免疫细胞化学新技术的介入有利于细胞学诊断依据的增加，免疫细胞化学在细胞学上的应用目前还不普及，由于制片的原因，致使多数病例的免疫细胞化学染色失败或对判读无助，因此需要高质量的制片来支持。细胞学标本行电镜检查是一个好方法，也因此解决了关键性的证据问题。可以通过更多的新技术、新方法，多方位和多视角地解决诊断问题是今后液基细胞学的课题和方向胸腔积液细胞病理学检查是临床病理学检查的主要手段之一,也是帮助临床查找病因、了解病情进展的重要方法。目前,胸腔积液良、恶性的诊断仅依靠细胞形态学诊断,由于受到标本性状、制片水平、阅片经验的限制,尤其是反应性间皮细胞呈现非典型性时与腺癌细胞在形态上存在交叉,鉴别时会很困难。我院应用液基细胞学检查与免疫细胞化学技术相结合的方法为诊断提供了很大的帮助, 【关键词】免疫细胞化学新技术 液基细胞病理学检查 提高细胞学癌症分型中的准确性 【中图分类号】R319 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）12-0365-01 50例在进行例液基细胞病理学检查的同时进行免疫细胞化学在液基细胞学中的应用。 1、方法; 免疫细胞化学步骤如下：在智能控温电加热器上加热载玻片，移除盖玻片（2秒）并立即浸泡在二甲苯（2分）中。下行梯度酒精水化。.用6％的过氧化氢水溶液阻断内源性过氧化物酶活性（3分钟，室温）。将涂片置于抗原修复液(S1699,Dako公司,加利福利亚洲卡宾特利亚)，并在90℃的压力锅中加热（10分钟）。.滴加生物素阻断剂阻断内源性生物素（X0590，Dako公司）。一抗孵育（22分钟，室温）。滴加结合液：生物素化抗小鼠免疫球蛋白，并孵育（22分钟）（K0690，抗体）。添加链菌素-生物素蛋白-过氧化物酶连接液并孵育（22分钟）（K0690，Dako公司）。将涂片置于二氨基联苯胺溶液中（10分钟）（K33468，Dako公司）。苏木素复染，Harris苏木精复染（15秒）。 如果是细胞核抗原则替换第10步，改为应用1％硫酸铜（1分钟，室温）作加强指示剂；0.2％碱性孔雀绿（2秒）复染。上行梯度酒精脱水，二甲苯透明，并封固。电镜下阅片。 技术路线： 2、仪器：智能控温电加热器、液基薄层细胞制片机、电子显微镜。 3、Sacco manno 溶液、二甲苯、酒精、6％的过氧化氢水溶液、抗原修复液(S1699,Dako公司,加利福利亚洲卡宾特利亚)、生物素阻断剂（X0590，Dako公司）、结合液：生物素化抗小鼠免疫球蛋白、链菌素-生物素蛋白-过氧化物酶连接液、二氨基联苯胺溶液、Harris苏木精、1％硫酸铜、0.2％碱性孔雀绿、tris缓冲液。 4、标本：液基细胞涂片等 5、结果判断：根据抗原、方法;免疫细胞化学步骤如下：在智能控温电加热器上加热载玻片，移除盖玻片（2秒）并立即浸泡在二甲苯（2分）中。下行梯度酒精水化。.用6％的过氧化氢水溶液阻断内源性过氧化物酶活性（3分钟，室温）。将涂片置于抗原修复液(S1699,Dako公司,加利福利亚洲卡宾特利亚)，并在90℃的压力锅中加热（10分钟）。.滴加生物素阻断剂阻断内源性生物素（X0590，Dako公司）。一抗孵育（22分钟，室温）。滴加结合液：生物素化抗小鼠免疫球蛋白，并孵育（22 分钟）（K0690，抗体）。添加链菌素-生物素蛋白-过氧化物酶连接液并孵育（22分钟）（K0690，Dako公司）。将涂片置于二氨基联苯胺溶液中（10分钟）（K33468，Dako公司）。苏木素复染，Harris苏木精复染（15秒）。如果是细胞核抗原则替换第10步，改为应用1％硫酸铜（1分钟，室温）作加强指示剂；0.2％碱性孔雀绿（2秒）复染。上行梯度酒精脱水，二甲苯透明，并封固。电镜下阅片。 技术路线： 6、仪器：智能控温电加热器、液基薄层细胞制片机、电子显微镜。 7、Sacco manno 溶液、二甲 苯、酒精、6％的过氧化氢水溶液、抗原修复液 (S1699, Dako 公司,加利福利亚洲卡宾特利亚) 、生物素阻断剂（X0590，Dako 公司）、结合液：生物素化抗小鼠免疫球蛋白、链菌素-生物素蛋白-过氧化物酶连接液、二氨基联苯胺溶液、Harris 苏木精、1％硫酸铜、0.2％碱性孔雀绿、tris 缓冲液。 8、标本：液基细胞涂片等 结果