荧光PCR法半定量肺炎支原体的研究.pdfVIP

中国卫生检验杂志 2009年 4 月 第 19卷 第 4 期 　Ch inese Journal of H ealth L aboratory Technology, Ap r 2009; Vol 19　No 4 755 【论著 】 荧光 PCR 法半定量肺炎支原体的研究 1 1 1 2 3 胡大康 , 张瑾 , 刘池波 , 杨敏 , 李向阳 ( 1浙江省台州市立医院检验科 , 浙江台州 　3 18000; 2 浙江省台州市立医院儿科 , 浙江台州 　3 18000; 3温州医学院附属第二医院检验科 , 浙江温州 　325027) ( ) ( ) [摘要 ] 　目的:研究 M PL I 肺炎支原体载量指数 的参考范围 ,探讨其在儿童肺炎支原体 M P 感染诊断中的应用价值 。 方法 : 2008年 3月末采集 3～6岁健康儿童咽拭子标本 128例 ,采用 FQ - PCR 法分别检测 M P - DNA 和 H actin - DNA 后 ( ) ( ) 计算 M PL I值 :M PL I = - lg M P - DNA 拷贝量 /H actin - DNA 拷贝量 ,然后算出M PL I的参考范围 P5 。2008年 3月 ～7 月于我院儿科采集临床患儿咽拭子标本 110 例及其双份血清 ,分别用 FQ - PCR 法和 M P - IgM 法检测咽拭子和血清标 本 。以单次或双次 M P - IgM 型抗体阳性作为判定 M P感染的标准 ,算出各种方法的 SEN 、SPE、+ PV、- PV ,并制作 M PL I 的 ROC 曲线 。比较 P5 与 ROC 曲线所得界值的优劣 。结果 : ROC所得 M PL I界值优于 128例健康儿童 M PL I的 P5 界值 , 所以, 3 ～6 岁儿童咽拭子 M PL I的参考范围为 : ≥590。根据金标准 , 110例标本中有 26例确诊为 M P感染 ; 以此为基础 , 一次 M P - IgM 法的 SEN 、SPE、+ PV、- PV 分别为 731% 、1000% 、1000%和 923% ;两次 M P - IgM 法的均为 1000% ; 单一 FQ - PCR 法的依次为 269% 、952 % 、636%和 808% ; M PL I的依次为 269% 、988% 、875%和 814 % 。结论 : ( ) 1 单一 FQ - PCR 法测定 M P - DNA 的弱点很明显 :假阳性率高 ,主要由于未对临床标本